丹参减压与常压提取的水提液的物理性质比较

杨秀梅， 黄 娟， 韩 丽*， 伍振峰，2， 张 超， 杨 明，2

（1.成都中医药大学 中药资源系统研究与开发利用国家重点实验室培育基地， 四川 成都 611137； 2.江西中医学院 现代中药制剂教育部重点实验室， 江西 南昌 330004）

丹参减压与常压提取的水提液的物理性质比较

杨秀梅1， 黄 娟1， 韩 丽1*， 伍振峰1，2， 张 超1， 杨 明1，2

（1.成都中医药大学 中药资源系统研究与开发利用国家重点实验室培育基地， 四川 成都 611137； 2.江西中医学院 现代中药制剂教育部重点实验室， 江西 南昌 330004）

目的 比较丹参减压水提液与常压水提液的物理性质及丹酚酸B量。方法 分别测定两种水提液的表面张力、电导率、 Zeta电位、 pH值、 溶液中物质的粒径、 丹酚酸 B量， 以及干膏收率的大小， 并进行比较。 结果 除导电率外，其余参数均具有显著性差异。减压提取液表面张力更高，表明减压提取出的总成分较常压提取少，且干膏收率减压小于常压， 说明减压提取出的杂质较常压少；pH值减压小于常压， 丹酚酸 B量减压高于常压， 说明减压提取出了更多的丹酚酸 B； 减压提取液的 Zeta电位较低， 其溶液中物质粒径较大， 具体原因有待进一步研究。 结论 减压提取更适宜于丹参水溶性成分丹酚酸B的提取。

丹参； 减压提取； 丹酚酸B； 物理性质

丹 参 为 唇 形 科 植 物 丹 参 Salvia miltiorrhiza Bunge的干燥根及根茎， 味辛、 苦， 性微寒， 归心、肝经。为临床常用中药，具有活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神等功效。其有效成分主要分为水溶性酚酸类和脂溶性二萜醌类［1］。 而水溶性酚酸类中含量最高的是丹酚酸 B，其对心血管疾病有较强的药理作用［2］。 但是丹酚酸 B为热敏性成分［3］， 传统的常压回流提取对其破坏较大，因此低温动态的减压回流提取对于丹参水溶性成分丹酚酸 B的提取具有明 显优势［4-5］。经过前期实验，利用正交设计筛选出减压提取的最佳工艺为70 ℃下， 加12 倍量水，回流提取3 次， 每次2 h， 以此作为本实验样品溶液的制备工艺。 本实验从水提液的 表 面 张 力、 电导 率、 Zeta电 位、pH值、 提取液中物质粒径等方面比较丹参减压提取与常压提取水提液物理性质的差异，结合两种水提液中丹酚酸B含有量和干膏收率，为丹参水溶性成分丹酚酸B的减压提取工艺作进一步分析。

1 仪器与材料

OCAT21 表面 /界 面张力 仪 （ 德国 Dataphysics公司）； PHS-3C精密 PH计； Zeta电位仪； Malvern纳米粒度仪 （型号 Nano-ZS）； 岛津 LC-10A高效液相色谱仪； 丹参药材 （购于四川科伦天然药业有限公司， 批号 111108）， 丹酚酸 B对照品 （中国药品生物制品检定所， 批号 111562-200605）； 甲醇（色谱纯）、 乙腈 （色谱纯） 等。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备

2.1.1 减压提取液的制备 称取丹参饮片 30 g，加12 倍量水， 于 70 ℃下减压回流提取3 次， 每次2 h，过滤得丹参减压提取水溶液。

2.1.2 常压提取液的制备 称取丹参饮片 30 g，加12 倍量水， 常压回流提取 3 次， 每次2 h， 过滤得丹参常压提取水溶液。

2.1.3 对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸 B对照品14.08 mg置 10 mL量瓶中，75%甲醇溶液定容， 摇匀， 作为贮备液； 精密量取 1 m L于 10 mL量瓶中， 75%甲醇溶液定容， 摇匀， 即得 0.140 8 mg/mL丹酚酸 B对照品溶液。

2.1.4 丹酚酸 B测定供试品溶液的制备 精密吸取提取液 1 mL于 25 mL量瓶中，75%甲醇溶液定容， 摇匀， 0.45 μm微孔滤膜滤过， 取续滤液即得。

2.2 丹参提取液表面张力的测定 采用 OCAT21表面/界面张力仪测定丹参常压与减压提取液的表面张力， 各提取液平行测定 3 次， 运用 SPSS 17.0统计软件对试验数据进行独立样本 t检验对比分析，测定结果见表1。

表1 丹参常压提取液与减压提取液的表面张力测定Tab.1 Sur face tension of Danshen vacuum extract and atmosPheric extract

统计分析结果显示，两组数据方差不齐，双侧检验 P=0.027， P＜0.05， 常压提取液与减压提取液的表面张力有显著性差异，减压提取液表面张力显著大于常压提取液表面张力。

2.3 丹参提取液电导率的测定 采用 OCAT21 表面/界面张力仪测定丹参常压与减压提取液的电导率， 各提取液平行测定 3 次， 运用 SPSS 17.0 统计软件对试验数据进行独立样本t检验对比分析，测定结果见表2。

经统计分析，两组数据方差齐，双侧检验P= 0.190， P＞0.05， 表明常压提取液与减压提取液电导率没有显著差异。

2.4 丹参提取液 pH值测定 采用 pHS-3C精密pH计测定丹参常压与减压提取液的 pH， 各提取液平行测定 3 次， 运用 SPSS 17.0 统计软件对试验数据进行独立样本 t检验对比分析，测定结果见表3。

表2 丹参常压提取液与减压提取液的电导率测定Tab.2 Conductivity of Danshen vacuum extract and atmosPheric extract

表 3 丹参常压提取液与减压提取液的 PH测定Tab.3 PH value of Danshen vacuum extract and atmos-Pheric extract

统计结果显示，两组数据方差齐，双侧检验P=0.000， P＜0.05， 两者有显著统计学差异， 减压提取液pH值显著低于常压提取液。

2.5 丹参提取液 Zeta电位的测定 采用 Zeta电位仪测定丹参常压与减压提取液 Zeta电位， 各提取液平行测定 3 次， 运用 SPSS 17.0 统计软件对试验数据进行独立样本 t检验对比分析， 测定结果如表4。

表 4 丹参常压提取液与减压提取液的 Zeta 电位测定Tab.4 Zeta Poten tial of Danshen vacuum extract and atmosPheric extract

统计分析显示，两组数据方差齐，双侧检验P=0.008， P＜0.05， 两者具有显著的统计学差异， 减压提取液 Zeta电位绝对值低于常压提取液Zeta电位绝对值。

2.6 丹参提取液中物质的粒径的测定 采用 Malvern 纳米粒度仪测定丹参常压与减压提取液中物质的粒径， 各提取液平行测定 3 次， 运用 SPSS 17.0统计软件对试验数据进行独立样本 t检验对比分析， 测定结果见表5。

统计结果显示，两组数据方差齐，双侧检验P=0.000， P＜0.05， 两者有显著统计学差异， 减压提取液纳米粒径平均值显著大于常压提取液纳米粒径平均值。由光强分布图可知，常压提取液粒径分布在 400 ～800 nm， 减压提取液 粒 径 分 布 在2 000 ～6 000 nm， 减压提取液纳米粒径远大于常压提取液。

表5 丹参常压提取液与减压提取液的粒径测定Tab.5 Particle size of Danshen vacuum extract and atmos-Pheric extract

2.7 丹参提取液中丹酚酸 B和干膏率的测定

2.7.1 色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶柱，安捷伦 ODS （250 mm ×4.6 mm），5 μm； 乙 腈-0.5%磷酸水 （28 ∶72） 为流动相， 检测波长286 nm， 体积流量 1.0 mL/min； 进样量 1 μL； 柱温30 ℃。

2.7.2 干膏收率测定 各取丹参减压和常压水提液 50 mL于恒重的蒸发皿中， 水浴加热挥干， 置105 ℃烘箱中干燥并恒重， 冷却至室温， 称重并计算干膏收率。

平行制备常压和减压提取液各3份，测定其结果如表6。

表6 丹参常压提取液与减压提取液的丹酚酸 B及干膏收率测定 （n=3）Tab.6 Salvianolic acid B and rate of dry extractof Danshen vacuum extract and atmosPheric extract（ n= 3）

结果表明，减压提取水溶液中丹酚酸B的量明显高于常压提取水溶液，且减压提取干膏收率相对较低。说明减压提取对丹酚酸B的破坏降低，此外还减少了一些杂质的溶出。

3 结论与讨论

本实验结果表明减压提取液与常压提取液的表面张力、 Zeta电位、 pH值、 粒径方面均有显著性差异，且减压提取液中丹酚酸B的量更高，干膏收率较低。表面张力是液体重要的物理性质，纯水的表面张力为 72.8 mN/m （20 ℃）［6］， 含有机物的水溶液其表面张力随着有机物的浓度的增大而降低。丹参减压提取液的表面张力高于常压提取液的表面张力，说明减压提取出的总成分少于常压提取出的总成分。而减压提取的干膏收率小于常压提取，表明减压提取的杂质少于常压提取。原因在于减压提取温度相对较低，能降低一些大分子杂质如淀粉、 鞣质、 黏液 质等的 溶出［7］。 然而， 减压提取液 pH值小于常压提取液 pH值， 说明减压提取液的酸性更强，即酚酸性成分含有量更高。经定量测定发现，提取液中丹酚酸B的含有量减压提取高于常压提取，说明减压提取对热敏性的丹酚酸B的破坏较常压小。综上，减压提取更适宜于水溶性丹酚酸B的提取。

Zeta电位是表征胶体分散系稳定性的重要指标，溶液中物质的粒径大小是分散系分类的依据［8］， 导电 率反应了提 取 液 中离子浓度 的 大 小。中药提取液是真溶液、胶体溶液、混悬液等多种分散体系的混合体系，成分十分复杂。因此本实验仅对 Zeta电位、 溶液中物质的粒径和导电率作为物理指标进行测定， 结果显示两种提取液的 Zeta电位和溶液中物质粒径均具有显著性差异 （P＜0.05）， 导电率无显著性差异 （P＞0.05）。 但是这些物理参数对中药提取液的具体指导意义尚未研究清楚，有待进一步研究。实验结果表明减压提取液中物质的粒径大于常压提取液，这些大粒径的物质的出现可能与温度有关，较低的温度虽然降低大分子的溶出，但是同时也降低了已经溶出的大分子物质的分解，因此减压提取液中物质的粒径较常压提取液的大。

减压提取是通过控制真空度来调节溶液沸点的动态提取，与常压提取不同的是提取时的沸点不同，它能在较低的温度下达到沸腾状态。减压提取可根据目标成分对温度的敏感性选择适宜的提取温度，降低目标成分的分解，从而提高提取效率。本实验比较了丹参 70 ℃的减压提取液和 100 ℃的常压提取液，由于提取温度不同，导致提取液的成分种类和数量有差异，提取液中成分间相互作用和存在形式也会有差异，因此减压提取液与常压提取液的物理参数存在差异。

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［ 2 ］ 王 蓉.丹酚酸 B药理作用的研究概况［J］.中医药导报，2011， 17（4）： 131-132.

［3］ 朱金墙，闫 晨，康立源.丹酚酸B的稳定性及其降解机理研究进展［ J］.中国中医药信息杂志， 2012， 17（12）：113-114.

［ 4 ］ 陈晓东.中药减压提取法原理及突破点［J］.机电信息，2008， 23： 31-34.

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［ 6］ 刘幸平.物理化学［M］.北京： 中国中医药出版社，2005： 202.

［7］ 韩 丽，韦 娟，周子渝，等.栀子减压提取工艺实验研究［ J］ .中成药， 2011， 33（1） ： 160-162.

［8］ 李 霞，马家骅，李 楠，等.当归补血汤相状态的研究［J］.中国实验方剂学杂志， 2011， 17（2）： 4.

Com Parison of Physical ProPerties of Danshen vacuum extract and atmosPheric extract

YANG Xiu-mei1， HUANG Juan1， HAN Li1*， WU Zhen-feng1，2， ZHANG Chao1， YANGMing1，2
（1.Research on Chinese Medicine Resources System and Developmentand Utilization Sichuan ProvinceWork Together for a Baseof Cultivation of State Key Labortory， Chengdu University of Traditional ChineseMedicine， Chengdu 611137， China； 2.Key Laboratory ofModern Preparation of TCM， Ministry of Education， Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine， Nanchang 330004， China）

Danshen （ Salviae miltiorrhizae radix et Rhizoma ）； vacuum extract； danshensuan B，physical property

R284.2

： A

： 1001-1528（2014）01-0082-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2014.01.020

2013-03-14

国家自然科学基金面上项目 （81173565）； 四川省教育厅重点项目 （10ZA093）

杨秀梅 （1988—） ， 女， 硕士， 研究方向： 中药制剂新技术。 Tel： 13568997942 ， E-mail： 564004232@qq.com

*通信作者： 韩 丽， 教授， 硕士生导师， 研究方向： 中药新制剂、 新技术、 新剂型。 Tel：（028）68100127， E-mail： hanliyx@163.com