RNA干扰技术干涉后核糖体蛋白S15a在胃癌中的表达及意义

刘勇攀 石定 王泽军 于香

RNA干扰技术干涉后核糖体蛋白S15a在胃癌中的表达及意义

刘勇攀 石定 王泽军 于香

目的 探讨RNA干扰（RNAi）技术干涉后核糖体蛋白S15a（RPS15a）在胃癌中的表达及意义。方法选取12例胃癌患者手术切除的胃癌组织，利用RNAi干涉RPS15a基因，将小片段克隆到质粒中，分别提取质粒后转染胃癌细胞BGC823。将未转染、随机小片段转染非编码序列、siRPS15a-1转染、siRPS15a-2转染的BGC823细胞分为BGC823-WT组、siNC组、siRPS15a-1组、siRPS15a-2组，RT-PCR法及Western blot分别检测各组RPS15a RNA及蛋白的表达情况，流式细胞仪检测细胞增殖的变化。结果RNAi后细胞中出现了明显的绿色荧光，提示此转染方式是可行的。转染检测结果表明，本实验提取的RNA未受到质粒DNA的污染，可以进行表达的比较。siRPS15a-1组、siRPS15a-2组RNA及蛋白表达相对灰度比值与BGC-WT组、siNC组比较，差异均有统计学意义（均P＜0．05），BGC-WT组与siNC组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。RNAi后细胞增殖速度显著下降，多数细胞集中在G0/G1期。结论RNAi技术不仅可以下调RPS15a在胃癌中表达，而且还可以抑制胃癌细胞的增殖活性。

核糖体蛋白 S15a 胃癌 RNA干扰

胃癌是最主要的恶性肿瘤类型之一，分子生物学研究表明癌基因、抑癌基因和细胞周期控制基因的异常表达参与了胃癌的发生、发展。核糖体蛋白S15a（ribosomal protein S15a，RPS15a）是核糖体蛋白家族中的一员，在蛋白质的生物合成中起重要作用。近年来，越来越多的证据表明RPS15a除组成核糖体促进蛋白质的生物合成，参与细胞的增殖、分化、凋亡外，还具有独立于蛋白质生物合成作用之外的功能，尤其是参与肿瘤的发生、发展的已引起广泛重视，但其具体的作用机制尚不清楚。……