瘦素对大鼠肝纤维化星状细胞的作用及相关ERK信号转导机制

周光耀 金玲湘 林巍 潘陈为 诸葛璐 方佩佩

瘦素对大鼠肝纤维化星状细胞的作用及相关ERK信号转导机制

周光耀 金玲湘 林巍 潘陈为 诸葛璐 方佩佩

目的探讨瘦素（leptin）对大鼠肝纤维化星状细胞（HSC）的作用及相关信号转导机制。 方法 采用改良原位灌注、Optiprep密度梯度离心法分离纯化大鼠HSC。通过台盼蓝拒染试验评估细胞存活率，α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫组化鉴定，光镜观察形态学变化。将40只SD大鼠分为4个处理组：对照组、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）组（加入10-7mol/L AngⅡ）、Leptin组（加入100ng/ml Leptin）、Leptin+AngⅡ组（加入100ng/ml Leptin+10-7mol/L AngⅡ）。分别采用3H-TdR和3H-Pro掺入法进行HSC增殖和胶原合成的测定。Western blot检测各处理组p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2、AngⅡ蛋白表达情况。结果 大鼠HSC存活率＞90%，传代1次后HSC纯度＞95%。与对照组相比，AngⅡ组、Leptin组、Leptin+AngⅡ组的HSC增殖和胶原合成均明显增加（均P＜0．05）；与AngⅡ组、Leptin组相比，Leptin+AngⅡ组HSC增殖和胶原合成明显增加（均P＜0．05）。Western blot显示，AngⅡ组、Leptin组、Leptin+AngⅡ组的p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2、AngⅡ蛋白水平均较对照组明显升高（均P＜0．05）；与AngⅡ组、Leptin组相比，Leptin+AngⅡ组p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2、AngⅡ蛋白水平明显升高（均P＜0．05）。 结论 瘦素可通过上调AngⅡ水平，激活ERK信号转导通路，刺激HSC增殖和胶原合成，导致肝纤维化。

瘦素 肝纤维化 HSC ERK 信号转导机制

肝纤维化（hepatic fibrosis，HF）是肝脏纤维组织过 度积聚的过程，其病理基础是肝细胞变性、坏死[1-2]。近年来研究表明，瘦素（leptin）水平与HF的发生、发展有着密切的相关性[3-4]。丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）通路是多种细胞生理过程的重要信号调节途径。胞外信号调节激酶ERK1/2是MAPK家族的一员，是调节细胞生长、发育等信号的网络核心。有研究表明，AngⅡ表达增高能够激活NAD（P）H氧化酶诱导产生活性氧物质，从而进一步激活MAPK等通路而调节肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）的增殖和迁移[5]。……