葛根总黄酮的提取精制及含量测定方法研究

陈志民，黄 阳，郭莹莹，杨昌云

(中国人民解放军第180医院药学科，福建 泉州 362000)

葛根为豆科植物野葛 Pueraria lobata Ohwi或粉葛 Pueraria thomsonii Benth.的干燥根，具有解肌退热、升阳止泻、透疹生津的功效。现代药理学研究证明，葛根具有改善心脑血管循环、扩张冠脉、改善心脏功能等作用[1－2]。同时，葛根还有提高学习记忆力、抗氧化、抗癌等作用。葛根中主要含有总黄酮这一活性成分，包括葛根素、大豆苷、大豆苷元等异黄酮类化合物。目前，葛根已被制成愈风宁心片、葛根素注射剂等多种制剂上市，这些制剂皆以葛根总黄酮为药效成分。本试验旨在探讨不同浓度乙醇对总黄酮提取条件的影响，并用溶剂法对其纯化。研究表明乙醇回流提取黄酮得率较高[3－5]，本试验对其进行优选研究，现报道如下。

1 仪器与试药

UV－8543型可见紫外分光光度计（美国惠普公司）；1100型高效液相色谱仪（Agilent公司），DAD紫外检测器，Zorbax S8－C18柱（250mm ×4.6mm，5 μm）。葛根素对照品（中国药品生物制品检定所，批号为0752－9806）；甲醇和乙腈为色谱醇；乙醇为市售分析纯；葛根药材（广州致信中药饮片有限公司，粤Y20090085）。

2 方法与结果

2.1 葛根总黄酮含量测定

2.1.1 色谱条件

流动相：甲醇－水－乙腈（12∶80 ∶8）；检测波长：250 nm；流速：0.8 mL/min；柱温：25 ℃。

2.1.2 溶液制备

精密称取葛根素对照品2mg，用甲醇溶解并定容于100 mL容量瓶中，避光、室温下保存，即得对照品溶液。按照2010年版《中国药典（一部）》[6]葛根供试品溶液的制备方法，取一定量葛根药材粉末（过3号筛），分别依法制备供试品溶液。

2.1.3 方法学考察

标准曲线绘制：称取葛根素对照品约2mg，精密称定，用甲醇溶解并定容于 100 mL 容量瓶中，精密称取 0，1.5，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 mL，置 10 mL 容量瓶中，甲醇定容。……