宫红梅
摘 要 综述了无胶筛分毛细管电泳在和蛋白质的分离分析中的应用实例,对这种方法的前景展望及发展趋势进行
讨论。
关键词 高效毛细管电泳;无胶筛分;蛋白质;电渗流
中图分类号:O629.73 文献标识码:A 文章编号:1671-7597(2014)07-0160-01
近年来,蛋白质组学的研究进展迅速,其中研究热点集中于蛋白质的分离检测与结构鉴定上。目前有关蛋白质的研究手段和方法较多,各有优缺点。毛细管电泳技术具有高效、快速、样品用量极少等特点,适合生物大分子的分析检测。但毛细管电泳分离蛋白质时,首先要解决的问题是蛋白质样品对管壁的吸附。
无胶筛分毛细管电泳是在缓冲溶液中添加线性高分子而不进行交联反应,溶液中高分子之间相互交缠形成网孔,从而对蛋白质等生物大分子按其大小进行筛分分离,无胶筛分的机制还不明确,存在几种理论模型:交缠溶液理论和高分子亚浓溶液线团收缩理论,Ogston、爬行和偏爬行模型和碰撞模型[1]。高分子溶液加入到缓冲液中,使电渗流得到抑制,同时也抑制了蛋白质的吸附,与凝胶电泳相比,它的制备工艺相对简单,寿命较长,操作简便,容易清洗等优点。
传统的SDS-凝胶电泳分离蛋白质的分辨率低,操作繁琐耗时,且所用药品有毒性,毛细管凝胶电泳可以克服上述缺点,但制备工艺复杂,凝胶寿命短,填充过程中容易产生气泡,影响分离。无胶筛分电泳具有更多的优点,容易填充和冲出,高分子聚合物在管中形成动态筛分网络,能很好的保持操作重现性,而且可以抑制电渗流,减少吸附。……