两种检测罗氏沼虾诺达病毒方法的比较

简贺君　谢俊刚

摘 要：分别用三抗体夹心酶联免疫吸附测定、逆转录聚合酶链式反应两种方法，检测20尾采集自广东省肇庆市的典型白肉病症状罗氏沼虾肌肉中的诺达病毒。检测结果是两种方法阳性检出率均为95%。结果表明，两种方法均能有效的应用在实验室检测罗氏沼虾诺达病毒。

关键词：罗氏沼虾；诺达病毒；三抗体夹心酶联免疫吸附测定；逆转录聚合酶链式反应

中图分类号 S966.1 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2014）08-151-03

Abstract：Three antibodies sandwich ELISA，reverse transcriptase polymerase chain reaction were used respectively to detect the Nodavirus from the muscle of 20 Macrobrachium Rosenbergii collected from Zhaoqing City，Guangdong Province，which have typical symptoms of white meat disease. The positive rate tested from these two methods was the same： 95%. The results of the comparison showed that both methods are effective on laboratory detection of Macrobrachium Rosenbergii Nodavirus.

Key words：Macrobrachium Rosenbergii；Nodavirus；Three antibody sandwich ELISA；Reverse transcriptase polymerase chain reaction

罗氏沼虾（Macrobrachium Rosenbergii）又名马来西亚大虾，属节肢动物门，甲壳纲，十足目，长臂虾科，虾科属，原产东南亚[1]。罗氏沼虾白浊病主要危害育苗期间的虾苗，虾苗淡化后放养到池塘3～5周内较易发生，其发病率一般为30%～70%，虾苗感染后死亡率高达90%，给我国罗虾养殖业造成巨大的经济损失[2]。

对于白浊病病原的研究，国外有学者从发病罗氏沼虾体内分离出病毒粒子[3]，钱冬等也发现罗氏沼虾白浊病病原是罗氏沼虾诺达病毒（Macrobrachium rosenbergii Nodavirus，MrNV）[4，5]。MrNV病毒粒子呈廿面体，无囊膜，大小为23～25nm，病毒核酸为单链RNA，由2个片段组成，分别为3.0kb和1.3kb[6]。这种病毒传染性极强，虾苗感染病毒后可在7d左右出现症状，目前该病仍缺乏行之有效的控制方法。

患白浊病的虾苗呈现典型的肌肉白浊状，所以在生产中一般通过肉眼观察来判断虾苗是否携带病毒。但此法容易造成误判，一是因为带毒虾苗可能不表现出典型的肌肉白浊状，二是因为其它原因也可引起虾苗肌肉白浊，例如细菌感染、水质影响或化学药物作用。……