HIF-1α和VEGF在扁平苔藓中的表达及意义

王胜 葛清莲

扁平苔藓是常见的慢性炎症性皮肤病之一, 其主要组织病理学改变为表皮角化过度, 基底细胞液化变性, 真皮浅层淋巴细胞带状浸润［1］, 其确切的发病机制至今尚未阐明。近年来扁平苔藓发病的机制一直是人们研究的热点。缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是在缺氧条件下广泛存在于动物和人体内的转录因子, 于1992年在细胞核提取物中发现, 可能为扁平苔藓发病的关键因素之一, 而HIF-1α可在基因水平上直接调控血管内皮生长因子(VEGF)的表达并促进扁平苔藓中真皮毛细血管的增生, 本实验拟用免疫组织化学方法, 检测扁平苔藓组织中的HIF-1α、VEGF的表达, 探讨HIF-1α、VEGF与扁平苔藓发病的关系。

1 材料与方法

1.1 材料 40例标本均来自本院皮肤科2011年5月～2013年12月手术切除的并经病理检查证实的扁平苔藓患者, 其中男15例, 女25例, 年龄25～72岁, 平均年龄48.5岁, 组织标本取出后立即浸入10%甲醛溶液中固定, 常规石蜡包埋,4 μm连续切片, HE染色, 同时取正常皮肤标本10例作为对照, 对照组病例均来自本院整形科。

1.2 主要试剂 鼠抗人HIF-1α单克隆抗体和鼠抗人VEGF单克隆抗体、即用SP型试剂盒和浓缩型DAB试剂盒均购自武汉博士德生物有限公司。

1.3 实验方法 链霉亲和素-过氧化物酶法(S-P)：将石蜡切片脱蜡至水化；加3%双氧水灭活内源性过氧化物酶；微波修复20 min, 滴加正常山羊血清封闭液, 依次加入一抗(HIF-1α工作浓度1：100稀释, VEGF工作浓度1：50稀释)、辣根过氧化物酶标记链霉素亲和素工作液；DAB显色, 苏木素复染脱水透明、封片。

1.4 染色结果的判定 HIF-1α表达定位于细胞核或细胞浆中, 阳性细胞染色呈棕黄色颗粒；……