斑马鱼耳聋基因Gfi与POU4f3的关联性

冯 晓,齐 麟,孟 娟

(1.河南大学淮河临床学院,河南开封475001;2.郑州大学第一附属医院耳科,河南郑州450052;3.铁道警察学院治安系,河南郑州450052)

斑马鱼耳聋基因Gfi与POU4f3的关联性

冯 晓1,2,齐 麟3,孟 娟2

(1.河南大学淮河临床学院,河南开封475001;2.郑州大学第一附属医院耳科,河南郑州450052;3.铁道警察学院治安系,河南郑州450052)

目的 运用转基因斑马鱼探讨信号蛋白Gfi与POU4f3之间关系。方法 阻止POU4f3在鱼受精卵中表达,构建该基因缺陷的转基因鱼,分析缺失该基因的斑马鱼形态及Gfi的表达。结果 POU4f3的缺陷程度与鱼神经组织发育的程度有明显相关性,与Gfi表达也有明显相关性。结论 POU4f3对Gfi表达有调控作用,二者与神经组织发育有明显相关性。

斑马鱼;Gfi;POU4f3;神经发育;关联性

近年来,通过单核苷酸多态性、高通量基因测序、基因芯片、基因组学等手段干预治疗癌症、遗传性疾病、神经再生,使临床的诊治能够快速准确的应用此技术。基因有些片段是无功能的,而蛋白质是生命活动的基础,我们通过建立疾病的蛋白质组学发现基因的相互作用,采用斑马鱼表达2个关联耳聋基因,观察其中的相互关联作用。

1 材料

DNA模板提取试剂盒(日本Takara公司);其他试剂均为国产分析纯;引物的合成由上海英骏生物技术有限公司完成;RT-PCR仪(美国ABI realtime PCR 7500 fast);基因测序仪为ABI PRISM377全自动荧光测序仪(美国PE ABI公司);构建POU4f3基因缺陷的鱼,以正常野生型的鱼作为对照,构建缺陷鱼采用受精卵细胞胞内注射停止转系序列的DNA片段构建POU4f3-/-的纯合体,正常野生型经基因型分析确定为POU4f3+/+,野生型鱼与纯合型鱼共同饲养,自然繁殖的受精鱼卵发育成鱼作为POU4f3+/-。……