结直肠癌中Ezrin的表达及与预后的关系

姚冬颖 许欣 赵振亚

结直肠癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一，近年来其发病率及死亡率均有明显上升的趋势［1］。侵袭和转移是恶性肿瘤重要的生物学行为和致死因素。埃兹蛋白(Ezrin蛋白)是新近发现且备受关注的肿瘤转移相关基因，研究发现其参与多种肿瘤的侵袭和转移过程。本研究通过免疫组化方法检测结直肠癌中的Ezrin蛋白的表达情况，探讨其在结直肠癌侵袭和转移中的作用，为临床诊断、治疗和预后判断提供新的理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2006年1月至2007年12月期间手术切除且临床病理及随访资料完整的结直肠癌标本120例，所有患者术前均未接受化疗、放疗和免疫治疗。男64例，女56例;年龄39～82岁，平均年龄59岁;肿物位于结肠54例，位于直肠66例;肿瘤最大直径＜5cm者44例，＞5cm者76例;高-中分化73例，低分化47例;侵犯深度未侵及浆膜35例，侵及浆膜85例;无淋巴结转移的78例，有淋巴结转移的42例;Dukes分期A+B期68例，C+D期52例。同时取正常结直肠黏膜组织20例作为对照。所有标本均采用常规取材，经10%中性缓冲甲醛液固定，石蜡包埋，做4 μm厚连续切片，做HE及免疫组化染色。

1.2 方法 应用免疫组vision两步法，鼠抗人Ezrin单克隆抗体(工作液)及免疫组化试剂盒均购于福州迈新生物技术有限公司。切片常规脱蜡至水，柠檬酸盐缓冲液中高温修复抗原15 min，室温下自然冷却，3%过氧化氢溶液阻断内源性过氧化物酶活性10 min，滴加一抗，湿盒内4℃过夜，滴加聚合物增强剂，滴加酶标抗鼠/兔聚合物，DAB显色。以试剂公司提供的阳性切片作阳性对照，PBS(磷酸盐缓冲液)代替一抗作阴性对照，每例都有HE切片作为对照观察。……