卢世明 刘占英 任焕焕 高 滨
(昌邑市人民医院,山东 昌邑 261300)
糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病较为常见的慢性并发症之一,研究发现DN的发生、发展及预后与血糖水平密切相关,高血糖所引发的氧化应激是DN的发病主要原因。本研究在对糖尿病大鼠模型测定其组织丙二醛、超氧化物歧化酶水平,并采用抗氧化剂α-硫辛酸及具有抗氧化性作用的甘草酸进行相关的干预治疗,以研究甘草酸对DN的抗氧化应激作用。
1.1材料 本研究中的6周龄Wister雄性大鼠,均来源于山东大学动物实验室,体重为180~200 g,喂养及处理药物的来源如下:链脲佐菌素(美国Alexi公司),α-硫辛酸(德国史达德药厂),甘草酸(南京正大天晴制药有限公司,国药准字号H20051942),DL-甘油醛(美国Sigma公司),NADPH(美国 Roche 公司),Bcl-2、Bax免疫组化测定药盒(北京中杉金桥生物技术有限公司),H-7500透射电镜(日本HITACHI公司)。
1.2方法 所有大鼠均进行适应性喂养1周,随机抽取10只大鼠进行正常饲料喂养,其余30只作为糖尿病组,进行如下干预,于大鼠左下腹注射链脲佐菌素溶液,72h后采用罗氏血糖仪检测血糖,若血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病模型建立。30只大鼠分为糖尿病对照组、α-硫辛酸治疗组及甘草酸治疗组,每组各10只。每日采用灌胃处理,α-硫辛酸组10 mg/kg˙d-1,甘草酸组30mg/kg˙d-1,4组大鼠分别采用等容量的生理盐水1 ml/100g˙d-1,灌胃第4,8,12,16周开始测定血糖及留取24 h的尿液测定大鼠的白蛋白含量,于第16周后处死大鼠,采用10%水合氯醛按400 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠,取大鼠的右肾相关组织放于4%的中性甲醛液中进行固定,后进行HE染色,将左肾的少量皮质切成约1 cm3的小块,后置放于3%的戊二醛溶液中固定,电镜下观察。……