GSTP1和RASSF1A在前列腺癌组织中的甲基化检测及其表达研究

张永旺　武振华　冯少勇　柯鑫文　张雁钢

【摘要】 目的：研究前列腺癌和前列腺增生组织中GSTP1和RASSF1A基因的甲基化差异及其蛋白表达情况，探讨GSTP1和RASSF1A基因甲基化作为前列腺癌早期诊断的价值，并揭示该基因甲基化与前列腺癌的发生发展的关系。方法：采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）方法检测GSTP1和RASSF1A基因启动子区CpG岛甲基化状态，并运用免疫组化SP染色法检测前列腺癌组织中GSTP1和RASSF1A基因的蛋白表达情况。结果：前列腺癌组织中GSTP1和RASSF1A基因甲基化检出率均明显高于前列腺增生组织，差异均有统计学意义（GSTP1：76.00%vs3.33%，P<0.001；RASSF1A：68.00%vs16.67%，P<0.001）。在前列腺癌中，GSTP1和RASSF1A蛋白阳性表达均明显低于前列腺增生组织，差异均有统计学意义（GSTP1：20.00%vs76.67%，P<0.001；RASSF1A：38.00%vs90.00%，P<0.001）。结论：GSTP1和RASSF1A基因异常甲基化可导致靶基因的蛋白表达降低，促进前列腺癌的发生发展。因此，GSTP1和RASSF1A基因在前列腺癌的发生、发展中起到重要作用，检测GSTP1和RASSF1A基因的甲基化有望成为前列腺癌早期诊断的分子标志物。

【关键词】 前列腺癌； GSTP1； RASSF1A； 甲基化； 甲基化特异性聚合酶链反应

前列腺癌（PCa）是老年男性的常见疾病。PCa在欧美地区占男性恶性肿瘤首位，是导致发达国家男性癌死亡的主要原因[1]。我国PCa发病率较欧美低，但近年来，我国PCa的发病率呈现明显上升趋势。目前，血清前列腺特异性抗原（PSA）作为PCa的单一检测指标，虽然具有较高的PCa阳性诊断预测率，但它受到年龄、前列腺按摩、穿刺、感染、药物等因素的影响，致使其诊断的敏感性、特异性不高，不能充分满足临床需要，因此，PCa急需要敏感特异的生物标记物。

肿瘤是多因素参与、多基因变异积累、多阶段发生的复杂的病理过程。PCa的发病机制尚未明确，探索PCa的发病机制，将为PCa的早期诊断与治疗提供理论依据。DNA甲基化是表观遗传学的主要修饰方式之一，在基因表达的调控、基因结构的稳定等方面有重要作用，与肿瘤的发生发展关系密切[2]。进一步研究发现，PCa的临床分期与DNA甲基化密切相关，甲基化往往发生在肿瘤的早期，且甲基化频率随着疾病的进展而增高[3]。……