反相高效液相色谱法评价烟台苹果中游离氨基酸

姜 宏,左利民,周 洁,邬旭然,山广志

(1.烟台大学化学化工学院,山东 烟台 264005;2.中国医学科学院医药生物技术研究所,北京 100050)

苹果是蔷薇科苹果属植物的果实,营养丰富,具有多种保健功效．氨基酸是苹果风味的主要组成物质,具有增鲜和提高机体免疫力的作用,苹果的质量与其所含氨基酸的种类、含量和组成密切相关[1]．微量元素、氨基酸[2]及糖、可溶性固形物等指标性成分采用聚类分析、主成分分析[3]等数理统计方法处理后,可用于地域性分析及品质鉴别[4]．

氨基酸的分析方法主要有氨基酸分析仪测定法[5]、高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培法(HPAEC-IPAD)[6]、气质联用[7]、毛细管电泳[8]、液质联用[9],这些仪器一般比较昂贵,不利于普及和应用．高效液相色谱法[10]操作简便、快速、结果准确、价格低廉,已普遍用于多种生物样品内氨基酸的检测．由于大多数氨基酸不含生色基团,在高效液相色谱法中需要通过衍生化的方法将氨基酸转化为具有较强紫外或者荧光吸收的衍生物进行测定．常用的氨基酸衍生剂包括邻苯二甲醛(OPA)、9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC)、异硫氰酸苯酯(PITC)等.OPA具有衍生步骤简单、反应速度快、剩余试剂不干扰测定的特点,将FMOC与OPA联用可同时检测一级和二级氨基酸,衍生化反应可在室温下进行,衍生化效率高,适合在线衍生[11],已广泛应用于食品、医药中氨基酸的检测[12-13]．

烟台是我国著名的苹果产地,目前有关烟台苹果中游离氨基酸组成及含量的研究比较少．本研究以……