高志刚 郭克建 宋少伟
胰腺癌恶性程度高,预后差,病死率居所有恶性肿瘤的第4位[1]。近年来,尽管诊断技术和治疗手段不断提高,但其早期诊断仍然困难,手术切除率低,5年生存率始终低于5%[1]。Musashi2(MSI2)属于进化保守的RNA结合蛋白Musashi家族成员之一,它位于17号染色体,是干细胞或祖细胞的标志物之一。文献报道[2-3],MSI2参与急性粒细胞白血病的发生、发展,是该病的治疗靶点和预后标志物。He等[4]报道,MSI2与上皮间质转化(EMT)有关,并且可作为肝癌预后潜在的生物学标记物,有助于肝癌术后的诊断和治疗。Emadi-Baygi等[5]报道,MSI2与胃癌的分级有关。但其在胰腺癌中的研究尚未见报道。本研究检测胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC)中MSI2的表达,并探讨其临床意义。
收集 2005年1月至2013年12月中国医科大学附属第一医院胰腺外科收治的61例具有完整临床资料并经病理证实的PDAC手术切除标本,以配对的癌旁组织为对照。其中51例有完整的随访资料。另取10例新鲜的PDAC及配对的癌旁组织标本,置液氮中冷冻保存。兔抗人MSI2单抗购自美国ABCAM公司。SP法免疫组化试剂盒、DAB显色液购自福州迈新公司。蛋白裂解液、蛋白酶抑制剂、上样缓冲液、BCA定量及ECL发光试剂盒均购自上海碧云天生物公司。RNA分离试剂 Trizol、逆转录试剂盒(DRR037S)、SYBR GreenⅡ实时荧光定量PCR 试剂盒等均购自日本Takara公司。本研究经中国医科大学附属第一医院道德伦理委员会批准,患者均签署知情同意书。
取10%甲醛固定的组织标本,石蜡包埋、切片、常规行免疫组化SP法检测MSI2蛋白的表达。……