固定化乳酸脱氢酶的催化性质研究

柳畅先，宁 静，俸红梅

(中南民族大学 化学与材料科学学院，武汉 430074)

固定化酶是用适当方法将酶固定于一定空间内，在保持自身特性时又能再回收和重复使用的酶制品.20世纪70年代以来对固定化酶的研究非常活跃[1]，其领域多为应用基础、工业生产等[2-6].壳聚糖是甲壳素的脱乙酰基产物，分子链中存在大量的氨基和羟基，可通过改性和交联，使其具有更多的功能[7-10].本文以壳聚糖为载体，戊二醛作为交联剂，对乳酸脱氢酶(LDH)固定化，研究酶催化动力学性质，探讨将其用于酶法测定的条件.

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

水浴恒温振荡器(SHA-C型,江苏医疗仪器厂)，紫外可见分光光度计(752型,上海光谱仪器有限公司)，精密pH计(PHS-3C型,上海雷磁仪器厂)，分析天平(FA-2004型,上海精科天平)，超级恒温水浴槽(CS-501型,武汉实验仪器厂)，集热式恒温加热磁力搅拌器(DF-101S型,河南省予华仪器有限公司)，增力电动搅拌机(JJ-1型,江苏金坛科兴仪器厂)，循环真空泵(SHZ-D型,上海东玺制冷仪器设备有限公司)，电动离心机(XYJ81-1型,金坛市恒丰仪器厂).

壳聚糖(国药集团化学试剂有限公司)，戊二醛25%水溶液(国药集团化学试剂有限公司)，液体石蜡(国药集团化学试剂有限公司)，span80(国药集团化学试剂有限公司), 石油醚(国药集团化学试剂有限公司)，丙酮(天津天大化学试剂厂)，冰乙酸(武汉中南化工试剂有限公司)，NaOH (湖北化工科技开发公司)，氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD，上海伯奥生物科技有限公司)，水合肼(天津科密欧化学试剂有限……