LC-MS-MS法测定人血浆中非布司他浓度

姜 楠，杨永革，宋丽雪，许雪廷 (北京军区总医院药理科，北京 100700)

非布司他 (febuxostat，FEB) 是新型的非嘌类黄嘌呤氧化酶选择性抑制剂[1]，临床上用于预防和治疗高尿酸血症及引发的痛风。其化学名称为(3-氰基-4-异丁氧基苯基) -4-甲基 -5-唑甲酸，是美国 FDA于 2009 年 2 月 13 日批准的用于治疗尿酸过高症的药物，至今国内仍未上市。到目前为止，关于非布司他的研究报道较少。为了更清楚了解非布司他的药学特点，本研究建立了简单、灵敏的LC-MS-MS检测人血浆非布司他浓度的方法，适用于非布司他人体药代动力学和生物等效性研究。

1 仪器与试剂

1.1仪器 质谱仪：Thermo Finnigan TSQ Quantum型液相色谱-三重四极杆质谱联用仪，配有电喷雾离子化源(ESI源)；Agilent 1100高效液相色谱系统： G1313A自动进样器；G1312A二元梯度泵；在线脱气机、柱温箱(美国Agilent公司)、分析柱为Thermo Biobasic-8柱(5 μm,50 mm×2.1 mm)；FinniganXcalibur 色谱/质谱数据系统。Sigma1-14型高速离心机(美国Sigma公司)；XW-80A微型涡旋混合仪(上海沪西分析仪器有限公司)；Ohaus Discovery型电子分析天平(奥豪斯国际贸易有限公司)。

1.2试剂 非布司他对照品(南京海辰药业有限公司，纯度99.5%，批号：20100401)，内标苯扎贝特对照品(中国药品生物制品检定所，批号：100732-200501)。乙腈、甲醇为色谱纯(均为Merck公司)；乙酸胺、甲酸为分析纯，水为重蒸去离子水。

2 方法与结果

2.1试验条件

2.1.1色谱条件 色谱柱：Thermo Biobasic-8柱(5 μm,50 mm×2.1 mm),流动相：乙腈-10 mmol/L乙酸铵(含0.05%甲酸)(70:30)，流速：0.2 ml/min；柱温：室温。

2.1.2质谱条件 电喷雾离子化电离源ESI负离子检测，喷雾电压(SP)3 500 kV，鞘气(SGP)流速10 Arb，辅助气(AGP)流速45 Arb，毛细管温度(TEM 270 ℃；非布司他和内标苯扎贝特的碰撞能量分别为10、18 eV；选择反应监测(SRM)分别测定非布司他和内标苯扎贝特负离子m/z315→271和m/z360→274；……