药用硫化汞纳米粉主要药效学研究

高丽娜 陈朝军 陆景坤 武世奎 王一博 赵立元 郭晓波

药用硫化汞纳米粉主要药效学研究

高丽娜 陈朝军 陆景坤 武世奎 王一博 赵立元 郭晓波

目的通过抗惊厥、镇静与烫伤治疗实验，研究合成的药用硫化汞纳米粉的主要药效，旨在探讨药用硫化汞纳米化对其药效学的影响。方法(1)烫伤作用：取小鼠30只，随机数字表法分成3组，90℃水造成浅二度烫伤模型，模型组仅涂抹麻油，阳性对照组涂抹京万红，实验组涂抹硫化汞纳米粉膏剂，观察各组小鼠烫伤部位的结痂情况。(2)镇静作用：取小鼠50只，随机数字表法分为5组，模型对照组灌胃给予蒸馏水，阳性对照组腹腔注射地西泮片，实验组给予药用硫化汞纳米粉，连续给药7天，并于末次给药后，依次给各组小鼠腹腔注射戊巴比妥钠，记录睡眠潜伏期、睡眠发生率及睡眠时间。(3)抗惊厥作用：取小鼠50只，随机数字表法分为5组，模型对照组灌胃给予蒸馏水，阳性对照组腹腔注射给予地西泮片，实验组为药用硫化汞纳米粉。连续给药七天，并于末次给药后，依次给各组小鼠注射戊四唑，制造惊厥模型。观察小鼠惊厥发生率。结果(1)烫伤作用：药用硫化汞纳米粉对伤口具有显著收敛作用(P≤0.01)(2)镇静作用：药用硫化汞纳米粉高、中、低剂量组均能显著减低睡眠潜伏期(P≤0.01)(3)抗惊厥作用：药用硫化汞纳米粉高、中、低剂量组惊厥率和死亡率明显较低(P≤0.01)。结论合成的药用硫化汞纳米粉具有治疗烫伤、镇静与抗惊厥的药理作用。

药用硫化汞纳米粉； 药效学； 治疗烫伤； 镇静； 抗惊厥

硫化汞为矿物药朱砂和蒙药银朱的主要成分，在中药、蒙药、藏药中均广泛应用[1]，安宫牛黄丸、孟根乌苏18味丸以及七十味珍珠丸等著名方剂中均配伍药用硫化汞。但传统工艺炮制的药用硫化汞生物利用度极低，在成药方剂中添加量较大，致使其在安全性方面饱受质疑[2]，大剂量使用硫化汞依然是民族医药发展的瓶颈。因此如何减毒增效成为该领域研究的热点。

纳米医药是近年医药领域研究的热点，并且在难溶药物如雄黄，三氧化二砷、牛黄的生物利用度和药效研究中取得了重大进展[3]。由于纳米颗粒具有较大的比表面积，其有效成分溶出量较常规尺寸颗粒有明显提高[4]。在藏药和印度医药中均报道人工炮制的药用硫化汞制品如佐太和ras-sindoor等传统药物中含有大量硫化汞纳米颗粒[5-6]。这表明在传统工艺中已融入了现代科技的因素。本课题组以硫代乙酰胺与硝酸汞作为前体一步湿法合成了硫化汞纳米粉[7]，硫化汞的纳米化有望提高其药效，减少在方剂中的使用量。本文主要研究合成纳米硫化汞的药理作用，此合成工艺为中药、蒙药中含硫化汞药材的炮制工艺提供新的途径，加快其现代化进程。

1 材料

1.1 试剂

药用硫化汞纳米粉(由本实验室合成并经电镜鉴定为纳米颗粒，纯度为100%)，冰片(购自呼和浩特市惠丰堂大药房)，京万红(天津达仁堂京万红药业有限公司，批号：211786)，地西泮片片(上海信谊药厂有限公司，批号：110901)，戊四唑(Sigma 公司，批号：1001189895)。

1.2 动物

选用体重为18～22 g的昆明种小鼠共130只，雌雄各半，购自内蒙古大学动物中心,动物许可证号SCXK(蒙)2002-0001。

2 实验方法

2.1 对小鼠实验性烫伤的影响

2.1.1 膏剂的配制 药用硫化汞纳米粉30 g，冰片5 g，用麻油20 ml和成膏，2～8℃保存，用时直接抹于患处。

2.1.2 动物分组及给药 取小鼠30只，随机数字表法分成3组，每组10只。用8%硫化钠背部脱毛，生理盐水洗净待干，用一口径为1.5 cm的无底有机玻璃圆筒置于脱毛处，向其内倒入90℃水，保留30秒，造成浅二度烫伤(水泡性，患处产生水泡)[8]，在烫伤30分钟后，每只小鼠均用医用棉签涂抹0.1 g药物。模型组在小鼠烫伤部位仅涂抹麻油，实验组涂抹药用硫化汞纳米粉膏剂，阳性对照组涂抹京万红。观察各组小鼠烫伤部位的结痂情况并记录结痂面积和脱痂时间(结痂面积=左右径×前后径)。

2.2 对戊巴比妥钠镇静的协同作用

取小鼠50只，体重18～22 g，雌雄各半，按体重随机数字表法分为5组，分别灌胃给予15×103mg/kg、10×103mg/kg、6.7×103mg/kg药用硫化汞纳米粉，阳性对照组腹腔注射0.2 mg/kg地西泮片，模型对照组灌胃给予蒸馏水，连续给药7天，并于末次给药30分钟后，依次给各组小鼠腹腔注射戊巴比妥钠75 mg/kg。观察小鼠翻正反射(消失1分钟以上记为发生睡眠)，记录睡眠潜伏期、睡眠发生率及睡眠时间。

2.3 对戊四唑致小鼠惊厥作用的影响

取小鼠50只，体重18～22克，雌雄各半，按体重随机数字表法分为5组，灌胃给予15×103mg/kg、10×103mg/kg、6.7×103mg/kg药用硫化汞纳米粉，模型对照组灌胃给予蒸馏水，阳性对照组腹腔注射给予4.5 mg/kg地西泮片。连续给药七天，并于末次给药60分钟后，依次给各组小鼠背部皮下注射戊四唑90 mg/kg，制造惊厥模型[9]。观察小鼠15分钟内惊厥发生率，惊厥潜伏期及死亡率，15分钟后的惊厥潜伏期记作900秒。

3 统计学方法

4 实验结果

4.1 对小鼠实验性烫伤的影响

烫伤实验结果如表1所示。经t检验统计分析，发现给药1天后，与模型组相比，药用硫化汞纳米粉组烫伤的结痂面积显著低于模型组(P≤0.01)；与京万红组(阳性对照)相比，硫化汞纳米粉组1天后的结痂面积显著低于京万红组，脱痂时间显著高于京万红组。给药15天后，与模型组相比，京万红组(阳性对照)、药用硫化汞纳米粉组的创面结痂面积和脱痂时间显著低于模型组(P≤0.01)；与京万红组相比，药用硫化汞纳米粉组结痂面积显著低于京万红组，脱痂时间显著高于京万红组，创面结痂面积没有显著性差异。实验结果表明药用硫化汞纳米粉对烫伤1天后的伤口收敛效果优于京万红，脱痂时间稍长于京万红。

表1 配制软膏对小鼠实验性烫伤的影响

注：与模型组相比aP<0.01；与阳性组相比bP<0.01。

4.2 对戊巴比妥钠镇静的协同作用

如表2所示，经t检验统计分析：地西泮片组睡眠潜伏期较模型组显著降低，睡眠率显著增加(P≤0.01)；药用硫化汞纳米粉高、中、低剂量组睡眠潜伏期均显著降低(P≤0.01)，睡眠率显著增加，且睡眠潜伏期存在剂量依赖关系，即随给药剂量增加，睡眠潜伏期依次降低。结果表明药用硫化汞纳米粉具有一定的协同镇静作用，但其作用弱于地西泮片组。

表2 对戊巴比妥钠镇静的协同作用的结果

注：与模型组相比aP<0.01；与阳性组相比bP<0.01。

4.3 对戊四唑致小鼠惊厥作用的影响

实验结果见表3，经t检验统计分析：地西泮片组惊厥潜伏期显著高于模型组，惊厥率和死亡率远低于模型组(P≤0.01)；药用硫化汞纳米粉高、中、低剂量组惊厥潜伏期均显著高于模型组(P≤0.01)，其中中剂量组惊厥潜伏期最长，硫化汞高、中、低剂量组死亡率均低于模型组，且存在剂量依赖关系，即随给药剂量增加，死亡率依序降低；药用硫化汞纳米粉高、中、低剂量组惊厥潜伏期均显著低于于地西泮片组(P≤0.01)。上述结果表明合成的药用硫化汞纳米粉具有抗惊厥作用，且存在剂量依存关系，但其作用弱于地西泮片。

表3 对戊四唑致惊厥作用的影响

注：与模型组相比aP<0.01；与阳性组相比bP<0.01。

5 结语

药用硫化汞纳米粉的合成工艺能够降低传统炮制工艺硫化汞药物中对工作人员的损害及环境污染，本课题组首次研究了通过简单的化学方法合成的药用硫化汞纳米粉的药效作用，发现此工艺合成的药用硫化汞纳米粉在治疗烫伤、抗惊厥、镇静方面均具有一定的作用。为蒙药的合成工艺提供了新的可选择的方法。但是因纳米特性的存在，能否通过减少给药剂量来降低汞的毒性、提高生物利用度，还需进一步药代动力学与毒理学研究探讨。

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[2]洪薇，赵静，李绍平，等.中药重金属限量控制现状与对策[J].药物分析杂志，2007，27(11):1849-1853.

[3]徐辉碧，杨祥良，谢长生，等.纳米技术在中药研究中的应用[J].中国药科大学报，2001，32(8):161-165.

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(本文编辑： 董历华)

Primarypharmacodynamicsresearchofmedicinalmercurysulfidenanopowder

GAOLi-na，CHENChao-jun，LUJing-kun，etal.

Collegeofpharmacy，InnerMongoliaMedicalUniversity，Huhhot010110，China

CHENChao-jun，E-mail：chenchaojun18@163.com

ObjectiveIn order to explore medicinal mercury sulfide nanopowderm by synthesis on its pharmacodynamics, we researched on the main efficacy of the medicinal mercuric sulfide nanopowder through anticonvulsants, sedation and burn treatment experiment.Methods(1)Healing burns effect：30 mice were randomly divided into 3 groups, and second-degree (superficial) burns model were established by 90 ℃ water. The mice from model group were only treated with sesame oil, the positive group with Jingwanhong and the experimental group with mercuric sulfide nano powder paste, Then observing burns scabby situation. (2) Sedation effect ：50 mice were randomly divided into 5 groups, the model group were given distilled water, the positive group in the abdominal cavity injection of diazepam, experimental group given medicinal mercuric sulfide nanopowder, for seven days continuously. Finally giving each group mice injection of sodium pentobarbital in turn and recording the incidence of sleep latency and sleeping time. (3) Anticonvulsive effect：Identical to the method of (2),except the pentobarbital sodium was replaced by pentylenetetrazo, After that observing the mice convulsion rates.Results(1) Medicinal mercuric sulfide nanopowder had a significant effect on the burning.(2) Medicinal mercuric sulfide nanopowder of high, middle, low dose group could significantly reduce the sleep latency. (3) Eclampsia rate and mortality of medicinal mercuric sulfide nanopowder group were significantly lower than model group.ConclusionIn this experiment condition, Medicinal mercuric sulfide nanopowder by synthesis has healing burns, sedation and anticonvulsant pharmacological effects.

Medicinal mercury sulfide nanopowde； Pharmacodynamics； Healing burns； Sedation； Anticonvulsant

010110 呼和浩特，内蒙古医科大学药学院[高丽娜(硕士研究生)、陈朝军、武世奎、王一博(硕士研究生)、赵立元(硕士研究生)、郭晓波(本科生)]，蒙医药研究院(陆景坤)

高丽娜(1988- )，女，2012级在读硕士研究生。研究方向：中蒙药学研究。E-mail:243792936@qq.com

陈朝军(1957- )，女，本科，教授。研究方向：中蒙药中重金属存在形态分析及毒代动力学研究。E-mail: chenchaojun18@163.com

R285.5

A

10.3969/j.issn,1674-1749.2014.02.005

2013-11-27)

基金支持：内蒙古自然科学基金(2012MS1209)