柴胡皂苷提取与含量测定方法研究

黄明泉

【摘要】目的：探讨柴胡中有效成分柴胡总皂苷和皂苷d的提取及含量测定方法，并对样品中成分进行含量测定。方法：以柴胡总皂苷与柴胡皂苷d为指标，分别采用紫外-可见分光光度法、HPLC法测定样品中柴胡总皂苷及皂苷d的含量。结果：经过测定，结果显示样品柴胡总皂苷含量均在65%以上，测定波长为536nm；皂苷d含量均在11%以上，最大吸收波长为204nm。结论：本实验所建立的提取及含量测定方法，操作简便，精密度良好，回收率合格，测定结果准确，可较好地用于柴胡皂苷的质量控制。

【关键词】柴胡；皂苷；提取；含量测定

柴胡是临床常用中药，属和解剂，临床主要用于少阳证，即寒热往来，胸闷口苦等，具清热解表，和解少阳之功，有南北柴胡之分，前者为狭叶柴胡的干燥根，后者是伞形科植物柴胡的干燥根[1]。

有实验研究证明[2]，柴胡根中的有效成分为柴胡皂苷，以及含有挥发油、植物甾醇等，相关的实验证实柴胡皂苷具有解热、镇痛、消炎等作用。因此，提高柴胡制剂中柴胡有效成分的含量对提高临床疗效具有重大的指导意义。近年来，随着科技的进步，多数实验采用各种新方法进行柴胡皂苷的提取及测定，有文献报道柴胡皂苷的主要组成为皂苷a、d、b1、b2等[3]，其中，前两者具有明显抗炎作用和降低血清胆固醇及甘油三酯的作用。故本文主要以柴胡总皂苷与柴胡皂苷d为指标，进行柴胡皂苷的提取研究，并采用紫外-可见分光光度法及HPLC法对其含量进行测定，为提高柴胡制剂的有效成分含量及提高临床疗效打下科研基础。现将研究情况报告如下。

实验材料

试药：柴胡：购于安徽省亳州市药材公司，经相关专家鉴定为伞形科植物柴胡的干燥根（北柴胡）；柴胡皂苷d对照品：购于中国食品药品鉴定研究院；屈臣氏纯净水；乙腈（色谱纯，Fisher公司）；其他试剂为分析纯（甲醇、乙醇、氨水）。柴胡总皂苷的含量测定：①检测波长：精密吸取200μL上述柴胡皂苷d对照品溶液置于小试管中，加入100μL的对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液（0.1%），水浴（70℃）反应10min，待自然冷却后，加入4.0mL磷酸，继续反应30min。根据“2005年版药典1部附录VA”规定在200～800nm范围内进行扫描。根据最大吸收，选择检测波长为536nm。②供试品溶液的制备：同上。③对照品溶液制备：精密称取适量柴胡皂苷d对照品，用甲醇配制成浓度为2.07mg/ml的对照品溶液。④标准曲线制备：取上述柴胡皂苷d对照品溶液2.0，4.0，6.0，8.0，10ml置于10mL量瓶中，甲醇稀释并定容，摇匀备用。同①，各取上述不同浓度溶液1ml进行反应并测定（536nm），以吸收值A为纵坐标，柴胡皂苷d的浓度C为横坐标，进行线性回归，得回归方程为：A=6×10-4C–0.072，r=0.9994。结果表明柴胡总皂苷在206～2060mg/L范围内线性关系良好。⑤精密度实验：分别取5份对照品溶液（400μl）、供试品溶液（1ml）置于量瓶中（10ml），甲醇稀释并定容，测定其吸光度。其结果对照品及供试品的RSD分别为1.52%、1.80%，表明精密度良好。⑥稳定性及重复性测定：测定样品同⑤，于不同时间点（10、30、40、60、90min）测定其吸收度，计算其RSD，结果为4.97%，故供试品溶液基本稳定。另取供试品溶液，平行测定5次。结果显示柴胡皂苷的平均含量为68.30mg/g，RSD为2.83%，表明可重复性良好。⑦回收率实验：在已知含量的样品溶液中加入定量的柴胡皂苷d对照品溶液，按上述方法进行测定，结果显示平均回收率为99.2%，RSD=2.06%，表明回收率符合要求。⑧样品测定：取已制得的三批不同柴胡皂苷提取物并配制成供试液，进行测定。最后计算三批样品中的柴胡总皂苷的含量，结果所示结论

虽然柴胡皂苷a和d均是柴胡皂苷的主要组成成分，两者均有明显抗炎作用和降低血清胆固醇及甘油三酯的作用。但有文献报道柴胡中皂苷d的含量远远高于其他皂苷的含量[4]，故在实验研究时选择皂苷d而不是皂苷a来作为柴胡总皂苷的含量测定指标的参照。经实验结果证明，其皂苷d含量在柴胡总皂苷中含量较高，故认为选取正确。

根据实验结果，皂苷d含量均值均在11%上，故假设认定柴胡中柴胡皂苷d的含量应达到10%以上才为合格柴胡，总皂苷含量均值达65%以上，故假定柴胡总皂苷含量应达到65%以上为达标。

本实验所建立的柴胡皂苷提取及含量测定方法，操作简便，精密度良好，回收率合格，测定结果准确，可较好地用于柴胡皂苷的质量控制。

参考文献

1中国国家药典委员会.中国药典Ⅰ部[M].北京：化学工业出版社，2005：565.

2肖功胜，杨云，刘富岗，等.柴胡皂苷提取和含量测定方法研究[J].中成药，2009，31（4）：595.

3杨志业，刘书芬，晁志，等.HPLC测定新疆柴胡属4种植物中柴胡皂苷a、c、d的含量[J].中国中药杂志，2008，33（4）：460.

4MAO Ren-gang，LIN Dong-hao，WANG Zhi-hua，et al.Quantitative analysis of Saikosaponin d in different species of Radix Bupleuri by HPLC[J].ChinTradition Herb Drugs，2002，33（5）：412.

【摘要】目的：探讨柴胡中有效成分柴胡总皂苷和皂苷d的提取及含量测定方法，并对样品中成分进行含量测定。方法：以柴胡总皂苷与柴胡皂苷d为指标，分别采用紫外-可见分光光度法、HPLC法测定样品中柴胡总皂苷及皂苷d的含量。结果：经过测定，结果显示样品柴胡总皂苷含量均在65%以上，测定波长为536nm；皂苷d含量均在11%以上，最大吸收波长为204nm。结论：本实验所建立的提取及含量测定方法，操作简便，精密度良好，回收率合格，测定结果准确，可较好地用于柴胡皂苷的质量控制。

【关键词】柴胡；皂苷；提取；含量测定

柴胡是临床常用中药，属和解剂，临床主要用于少阳证，即寒热往来，胸闷口苦等，具清热解表，和解少阳之功，有南北柴胡之分，前者为狭叶柴胡的干燥根，后者是伞形科植物柴胡的干燥根[1]。

有实验研究证明[2]，柴胡根中的有效成分为柴胡皂苷，以及含有挥发油、植物甾醇等，相关的实验证实柴胡皂苷具有解热、镇痛、消炎等作用。因此，提高柴胡制剂中柴胡有效成分的含量对提高临床疗效具有重大的指导意义。近年来，随着科技的进步，多数实验采用各种新方法进行柴胡皂苷的提取及测定，有文献报道柴胡皂苷的主要组成为皂苷a、d、b1、b2等[3]，其中，前两者具有明显抗炎作用和降低血清胆固醇及甘油三酯的作用。故本文主要以柴胡总皂苷与柴胡皂苷d为指标，进行柴胡皂苷的提取研究，并采用紫外-可见分光光度法及HPLC法对其含量进行测定，为提高柴胡制剂的有效成分含量及提高临床疗效打下科研基础。现将研究情况报告如下。

实验材料

试药：柴胡：购于安徽省亳州市药材公司，经相关专家鉴定为伞形科植物柴胡的干燥根（北柴胡）；柴胡皂苷d对照品：购于中国食品药品鉴定研究院；屈臣氏纯净水；乙腈（色谱纯，Fisher公司）；其他试剂为分析纯（甲醇、乙醇、氨水）。柴胡总皂苷的含量测定：①检测波长：精密吸取200μL上述柴胡皂苷d对照品溶液置于小试管中，加入100μL的对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液（0.1%），水浴（70℃）反应10min，待自然冷却后，加入4.0mL磷酸，继续反应30min。根据“2005年版药典1部附录VA”规定在200～800nm范围内进行扫描。根据最大吸收，选择检测波长为536nm。②供试品溶液的制备：同上。③对照品溶液制备：精密称取适量柴胡皂苷d对照品，用甲醇配制成浓度为2.07mg/ml的对照品溶液。④标准曲线制备：取上述柴胡皂苷d对照品溶液2.0，4.0，6.0，8.0，10ml置于10mL量瓶中，甲醇稀释并定容，摇匀备用。同①，各取上述不同浓度溶液1ml进行反应并测定（536nm），以吸收值A为纵坐标，柴胡皂苷d的浓度C为横坐标，进行线性回归，得回归方程为：A=6×10-4C–0.072，r=0.9994。结果表明柴胡总皂苷在206～2060mg/L范围内线性关系良好。⑤精密度实验：分别取5份对照品溶液（400μl）、供试品溶液（1ml）置于量瓶中（10ml），甲醇稀释并定容，测定其吸光度。其结果对照品及供试品的RSD分别为1.52%、1.80%，表明精密度良好。⑥稳定性及重复性测定：测定样品同⑤，于不同时间点（10、30、40、60、90min）测定其吸收度，计算其RSD，结果为4.97%，故供试品溶液基本稳定。另取供试品溶液，平行测定5次。结果显示柴胡皂苷的平均含量为68.30mg/g，RSD为2.83%，表明可重复性良好。⑦回收率实验：在已知含量的样品溶液中加入定量的柴胡皂苷d对照品溶液，按上述方法进行测定，结果显示平均回收率为99.2%，RSD=2.06%，表明回收率符合要求。⑧样品测定：取已制得的三批不同柴胡皂苷提取物并配制成供试液，进行测定。最后计算三批样品中的柴胡总皂苷的含量，结果所示结论

虽然柴胡皂苷a和d均是柴胡皂苷的主要组成成分，两者均有明显抗炎作用和降低血清胆固醇及甘油三酯的作用。但有文献报道柴胡中皂苷d的含量远远高于其他皂苷的含量[4]，故在实验研究时选择皂苷d而不是皂苷a来作为柴胡总皂苷的含量测定指标的参照。经实验结果证明，其皂苷d含量在柴胡总皂苷中含量较高，故认为选取正确。

根据实验结果，皂苷d含量均值均在11%上，故假设认定柴胡中柴胡皂苷d的含量应达到10%以上才为合格柴胡，总皂苷含量均值达65%以上，故假定柴胡总皂苷含量应达到65%以上为达标。

本实验所建立的柴胡皂苷提取及含量测定方法，操作简便，精密度良好，回收率合格，测定结果准确，可较好地用于柴胡皂苷的质量控制。

参考文献

1中国国家药典委员会.中国药典Ⅰ部[M].北京：化学工业出版社，2005：565.

2肖功胜，杨云，刘富岗，等.柴胡皂苷提取和含量测定方法研究[J].中成药，2009，31（4）：595.

3杨志业，刘书芬，晁志，等.HPLC测定新疆柴胡属4种植物中柴胡皂苷a、c、d的含量[J].中国中药杂志，2008，33（4）：460.

4MAO Ren-gang，LIN Dong-hao，WANG Zhi-hua，et al.Quantitative analysis of Saikosaponin d in different species of Radix Bupleuri by HPLC[J].ChinTradition Herb Drugs，2002，33（5）：412.

【摘要】目的：探讨柴胡中有效成分柴胡总皂苷和皂苷d的提取及含量测定方法，并对样品中成分进行含量测定。方法：以柴胡总皂苷与柴胡皂苷d为指标，分别采用紫外-可见分光光度法、HPLC法测定样品中柴胡总皂苷及皂苷d的含量。结果：经过测定，结果显示样品柴胡总皂苷含量均在65%以上，测定波长为536nm；皂苷d含量均在11%以上，最大吸收波长为204nm。结论：本实验所建立的提取及含量测定方法，操作简便，精密度良好，回收率合格，测定结果准确，可较好地用于柴胡皂苷的质量控制。

【关键词】柴胡；皂苷；提取；含量测定

柴胡是临床常用中药，属和解剂，临床主要用于少阳证，即寒热往来，胸闷口苦等，具清热解表，和解少阳之功，有南北柴胡之分，前者为狭叶柴胡的干燥根，后者是伞形科植物柴胡的干燥根[1]。

有实验研究证明[2]，柴胡根中的有效成分为柴胡皂苷，以及含有挥发油、植物甾醇等，相关的实验证实柴胡皂苷具有解热、镇痛、消炎等作用。因此，提高柴胡制剂中柴胡有效成分的含量对提高临床疗效具有重大的指导意义。近年来，随着科技的进步，多数实验采用各种新方法进行柴胡皂苷的提取及测定，有文献报道柴胡皂苷的主要组成为皂苷a、d、b1、b2等[3]，其中，前两者具有明显抗炎作用和降低血清胆固醇及甘油三酯的作用。故本文主要以柴胡总皂苷与柴胡皂苷d为指标，进行柴胡皂苷的提取研究，并采用紫外-可见分光光度法及HPLC法对其含量进行测定，为提高柴胡制剂的有效成分含量及提高临床疗效打下科研基础。现将研究情况报告如下。

实验材料

试药：柴胡：购于安徽省亳州市药材公司，经相关专家鉴定为伞形科植物柴胡的干燥根（北柴胡）；柴胡皂苷d对照品：购于中国食品药品鉴定研究院；屈臣氏纯净水；乙腈（色谱纯，Fisher公司）；其他试剂为分析纯（甲醇、乙醇、氨水）。柴胡总皂苷的含量测定：①检测波长：精密吸取200μL上述柴胡皂苷d对照品溶液置于小试管中，加入100μL的对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液（0.1%），水浴（70℃）反应10min，待自然冷却后，加入4.0mL磷酸，继续反应30min。根据“2005年版药典1部附录VA”规定在200～800nm范围内进行扫描。根据最大吸收，选择检测波长为536nm。②供试品溶液的制备：同上。③对照品溶液制备：精密称取适量柴胡皂苷d对照品，用甲醇配制成浓度为2.07mg/ml的对照品溶液。④标准曲线制备：取上述柴胡皂苷d对照品溶液2.0，4.0，6.0，8.0，10ml置于10mL量瓶中，甲醇稀释并定容，摇匀备用。同①，各取上述不同浓度溶液1ml进行反应并测定（536nm），以吸收值A为纵坐标，柴胡皂苷d的浓度C为横坐标，进行线性回归，得回归方程为：A=6×10-4C–0.072，r=0.9994。结果表明柴胡总皂苷在206～2060mg/L范围内线性关系良好。⑤精密度实验：分别取5份对照品溶液（400μl）、供试品溶液（1ml）置于量瓶中（10ml），甲醇稀释并定容，测定其吸光度。其结果对照品及供试品的RSD分别为1.52%、1.80%，表明精密度良好。⑥稳定性及重复性测定：测定样品同⑤，于不同时间点（10、30、40、60、90min）测定其吸收度，计算其RSD，结果为4.97%，故供试品溶液基本稳定。另取供试品溶液，平行测定5次。结果显示柴胡皂苷的平均含量为68.30mg/g，RSD为2.83%，表明可重复性良好。⑦回收率实验：在已知含量的样品溶液中加入定量的柴胡皂苷d对照品溶液，按上述方法进行测定，结果显示平均回收率为99.2%，RSD=2.06%，表明回收率符合要求。⑧样品测定：取已制得的三批不同柴胡皂苷提取物并配制成供试液，进行测定。最后计算三批样品中的柴胡总皂苷的含量，结果所示结论

虽然柴胡皂苷a和d均是柴胡皂苷的主要组成成分，两者均有明显抗炎作用和降低血清胆固醇及甘油三酯的作用。但有文献报道柴胡中皂苷d的含量远远高于其他皂苷的含量[4]，故在实验研究时选择皂苷d而不是皂苷a来作为柴胡总皂苷的含量测定指标的参照。经实验结果证明，其皂苷d含量在柴胡总皂苷中含量较高，故认为选取正确。

根据实验结果，皂苷d含量均值均在11%上，故假设认定柴胡中柴胡皂苷d的含量应达到10%以上才为合格柴胡，总皂苷含量均值达65%以上，故假定柴胡总皂苷含量应达到65%以上为达标。

本实验所建立的柴胡皂苷提取及含量测定方法，操作简便，精密度良好，回收率合格，测定结果准确，可较好地用于柴胡皂苷的质量控制。

参考文献

1中国国家药典委员会.中国药典Ⅰ部[M].北京：化学工业出版社，2005：565.

2肖功胜，杨云，刘富岗，等.柴胡皂苷提取和含量测定方法研究[J].中成药，2009，31（4）：595.

3杨志业，刘书芬，晁志，等.HPLC测定新疆柴胡属4种植物中柴胡皂苷a、c、d的含量[J].中国中药杂志，2008，33（4）：460.

4MAO Ren-gang，LIN Dong-hao，WANG Zhi-hua，et al.Quantitative analysis of Saikosaponin d in different species of Radix Bupleuri by HPLC[J].ChinTradition Herb Drugs，2002，33（5）：412.