辣椒素对脂多糖诱导血管内皮细胞活化的影响及机制*

卢 阳， 赵光举， 洪广亮， 邱俏檬， 李 冬， 卢中秋△

(温州医科大学 1附属第一医院急诊医学中心， 2 温州市第三临床学院风湿免疫科，浙江 温州 325000)

脓毒症是由感染引起的全身炎症反应综合征，可进一步发展为脓毒性休克及多器官功能障碍综合征，病死率居高不下。在脓毒症致病过程中，脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)能够上调血管内皮细胞(vascular endothelial cells，VECs)NF-κB的表达和活化水平，导致内皮细胞过度、持久及广泛的活化，是导致循环衰竭和组织器官损伤的关键环节[1]。辣椒素(capsaicin, CAP)具有抗炎、抗氧化、镇痛等广泛的药理作用。新近研究发现，辣椒素对NF-κB的表达和活化水平具有重要影响，提示其在脓毒症内皮细胞损伤中可能极具应用价值[2]。有鉴于此，本项目拟通过研究辣椒素对内毒素诱导血管内皮细胞活化的影响和机制，为其在脓毒症中的应用提供理论依据。

材 料 和 方 法

1 动物

清洁级ICR小鼠45只，雄性，体重18～22 g，由温州医科大学动物中心提供。原代培养的内皮细胞从小鼠主动脉中分离获取，连续传至3代。

2 主要试剂

DMEM/F12培养基、胎牛血清以及胰蛋白酶购自Gibco；LPS和CAP(以0.1% DMSO溶解后备用)购自Sigma； von Willebrand 因子(von Willebrand factor, vWF)兔单克隆抗体、NF-κB p65兔多克隆抗体和TATA框结合蛋白(TATA-box-binding protein,TBP)兔多克隆抗体均由Abcam提供；p-IκBα和IκBα兔单克隆抗体由Cell Signaling Technology提供；β-actin兔多克隆抗体以及细胞核蛋白和细胞浆蛋白提取试剂盒均购自中国南京Bioworld 生物公司；RIPA裂解液(强)和BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)均购自中国碧云天生物技术研究所；可溶性细胞间黏附分子1 (soluble intercellular adhesion molecule 1,sICAM-1)、可溶性血管细胞黏附分子1(soluble vascular adhesion molecule 1, sVCAM-1)和可溶性P-选择素 (soluble P-selectin, sP-selectin)ELISA试剂盒购自R&D Systems，上海西唐生物科技有限公司进口分装。……