吴玲玲,陈国敏,许会彬,王化芬,田玉静,杨丰梅,沈 雨
(1-3)-β-D葡聚糖是由D-葡聚糖合成的细胞壁多聚糖,占真菌细胞壁成分的50%以上[1]。研究表明,除结合菌外,所有真菌的细胞壁均含有(1-3)-β-D葡聚糖,而其他微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有这种成分,因此在机体的体液或血液中检测(1-3)-β-D葡聚糖水平可以作为诊断深部真菌感染的依据[2]。本研究对98例疑似深部真菌感染患者血浆(1-3)-β-D葡聚糖含量进行检测,同时对患者痰标本进行培养,探讨血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测对深部真菌感染的诊断价值,以期对临床抗真菌感染提供依据。
1.1 标本来源 2012年01月—2013年01月笔者所在医院疑似深部真菌感染的患者98例,同时行血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测和痰培养。
1.2 仪器与试剂 MB-80微生物动态快速检测系统,GKT-1M Set动态真菌检测试剂盒,T02智能恒温仪以及冰浴槽均购自北京金山川科技发展公司,血琼脂平板、巧克力琼脂平板及麦康凯琼脂平板均购自郑州安图绿科生物工程有限公司。
1.3 方法
1.3.1 血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测 ①血浆制备:无菌操作,用专用无热源真空采血管取静脉血4 ml轻轻混匀,3000 r/min离心1 min获得富含血小板血浆;②样品处理:取上述富含血小板血浆0.1 ml,加入样品处理液中,摇匀后插入恒温加热区中进行70℃干热10 min,取出后立刻放入冰浴槽中3 min冷却至30℃ 以下,即为待测血浆样品;③样品测定:取待测血浆样品0.2 ml加入反应主剂中,轻轻混匀,待完全溶解后,全部移液至平底试管中,立刻插入MB-80微生物快速动态检测系统中进行检测,反应结束后仪器自动计算结果。……