HPLC—MS—MS测定水产品中的甲基睾丸酮残留量

马瑞欣+苏欢欢+梁艳红+孙伟彬+郝新丽+张勇

摘 要：在研究基质效应的基础上，建立了乙酸乙酯提取，石油醚净化，氘代甲基睾丸酮为内标，甲醇和5 mmol/L乙酸铵（含0.15%甲酸）为流动相，梯度洗脱，高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS-MS）测定水产品中甲基睾丸酮残留量的方法。在2.0～500 ng/mL浓度范围内，线性良好，R2≥0.999；定量限为5.0 μg/Kg。空白样品添加标准物质后的回收率在75%～105%之间，相对标准偏差≤10%。该方法前处理简单，可适用于批量水产品中甲基睾丸酮残留量的快速定性定量检测。

关键词：高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS-MS）；水产品；甲基睾丸酮；内标法

17-α-甲基睾丸酮（17-αlpha-methyltestosterone）是一种人工合成的雄性激素，水产养殖中使用可提高产量，但在水产动物体内代谢缓慢，其残留会对人体造成危害。欧盟国家禁止在食品动物中使用甲基睾丸酮及其化合物，我国已经把甲基睾丸酮列入食品动物禁用的兽药清单[1]。

检测水产品中甲基睾丸酮残留量的方法有高效液相色谱法[2]和液质联用法[3-5]。液相色谱法[2]仍是目前农业部下达水产品抽查任务中的唯一方法，但其存在两个问题：一是样品基线干扰大，难以达到10 μg/kg的检测限，且容易出现假阳性[6]，造成定性和定量的不准确；二是采用乙醚提取，乙醚挥发性很强，易被氧化成过氧化物，过氧化物不稳定，加热易爆炸，给实验操作人员带来一定的安全隐患。虽然有文献对液相色谱法进行了改进[7-8]，但效果仍不理想。液相色谱-串联质谱法的测定方法[3-5]前处理需固相萃取净化，操作步骤太过繁琐，不适用于实验室批量检测任务。……