芒(Miscanthus sinensis)再生体系的建立和优化

黄丽芳，殷绪明，陈智勇，肖亮，易自力*

(1.中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室，湖南 长沙 410125；2.湖南农业大学生物科学技术学院，湖南 长沙 410128)

芒(Miscanthus sinensis)再生体系的建立和优化

黄丽芳1，殷绪明1，陈智勇2，肖亮2，易自力2*

(1.中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室，湖南 长沙 410125；2.湖南农业大学生物科学技术学院，湖南 长沙 410128)

以芒(Miscanthus sinensis)的幼穗为材料，通过外植体消毒灭菌、愈伤组织诱导、不定芽分化增殖、生根和驯化移栽，建立芒组织培养的快速繁殖体系。结果表明：芒愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+4.0 mg/L 2,4–D + 1.0 mg/L 6–BA + 0.5 mg/L CuSO4，愈伤组织诱导频率达99.33%；不定芽分化和增殖的最佳培养基分别为MS+1.0 mg/L 6–BA + 0.4 mg/L NAA + 0.4 mg/L IAA和MS+ 3.0 mg/L 6–BA +1.5 mg/L PP333+1.0 mg/L CCC，分化率为96%，增殖系数为9.1；生根培养基选用MS+0.5 mg/L IAA + 0.5 mg/L NAA + 0.5 mg/L CCC + 0.5 mg/L PP333，生根率达100%；将再生苗移栽至用黄土和营养土配制的基质上，其成活率高达95%，且生长势良好。

芒；能源植物；离体培养；正交设计；方差分析

笔者以多年生芒的幼穗为材料，通过愈伤组织诱导、不定芽分化增殖、生根和驯化移栽，拟建立芒组织培养的快速繁殖体系。

1 材料与方法

1.1 供试材料

供试材料为多年生芒(M. sinensis)，编号为B0634，采集于长沙，种植在湖南农业大学芒属能源植物资源圃。该芒草是从1 000多份野生资源中筛选出的优良株系，其植株高大，根状茎发达，抗逆性强，生物质产量高。

1.2 方 法

1.2.1 外植体的消毒

在孕穗期，选取颖花花原基形成期和花粉母细胞形成期的幼穗(旗叶刚抽出不久)，剪取幼穗的茎秆上端，剥去叶鞘和外层苞叶，保留最后一层苞叶，用70%乙醇彻底擦拭叶鞘和茎秆，然后在超净工作台上用0.1%氯化汞消毒15 min，无菌水清洗5次，放置在无菌滤纸上，吸干外植体表面水分，剥出幼穗后备用。……