非小细胞肺癌组织中Napsin-A表达与EGFR基因的相关性研究

韩志刚, 俞婷婷, 申红丽, 阿力木江·赛提瓦尔地

(新疆医科大学附属肿瘤医院 肺内一科, 新疆 乌鲁木齐, 830011)

作为一个极有潜力的肺腺癌诊断标志物，Napsin-A是天门冬氨酸蛋白酶家族中的新成员，可在异常增生的Ⅱ型肺泡上皮细胞、原发性肺腺癌和极少部分大细胞癌中表达[1-2]。表皮生长因子受体(EGFR)具有酪氨酸激酶活性，为原癌基因e-erbB-1的表达产物。研究[3]表明，EGFR在非小细胞肺癌(NSCLC)、前列腺癌、大肠癌及乳腺癌组织中均过度表达。本研究通过分析NSCLC组织中Napsin-A表达与EGFR基因的关系，来探讨Napsin-A在肿瘤形成过程中的作用，以期为NSCLC的临床诊断、治疗及预后评估提供帮助，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2012年6—12月本院收治的经病理确诊并取得组织标本的NSCLC 89例，其中腺癌53例，鳞癌36例。所有患者的血红蛋白、肝肾功能和心电图检查均正常，既往均未接受过放疗、化疗，无其他恶性肿瘤病史及心脑血管疾病。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂：兔抗人Napsin-A多克隆抗体、SABC试剂盒和DAB显色试剂盒均购自北京中杉生物技术有限公司。

1.2.2 免疫组织化学检测：全部组织标本均经4%甲醛固定，石蜡包埋，4 μm切片，连续4张, 60 ℃恒温箱中烘烤20 min, 脱蜡水化。采用3%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶，进行抗原修复，滴加一抗, 4 ℃冰箱过夜；滴加二抗，冲洗后DAB染色；苏木素复染、脱水、封片。以PBS代替一抗作为阴性对照，试剂生产公司提供的切片作为阳性对照。

1.2.3 EGFR基因检测：将提取的DNA稀释成2 ng/μL, 取出阳性质控品和Taq酶(EGFR29), 阳性质控品先解冻，再振荡混匀，两者快速离心15 s待用；……