孙 悦 ,勾天兵 ,韩 姣 ,李 娟 ,王晓丹
(1.吉林省林业科学研究院,吉林 长春 130033 2.长春市绿园区林业站,吉林 长春 130062)
赤眼蜂(Trichogrammassp.)被广泛用于防治稻纵卷叶螟、玉米螟、松毛虫等农林害虫,在常年放蜂的地区,寄生率保持在70%~80%,农药使用总量减少50%~80%, 大大减少了农作物和土壤中的农药残留量,环境质量明显改善[1]。到目前为止,很多学者对赤眼蜂的生物学特性、种群繁育、应用及农药对赤眼蜂的药害与毒性[2~5]等方面做了大量研究工作,但对赤眼蜂本身对农药的抵抗能力方面的研究报道较少。为此,作者以松毛虫赤眼蜂为对象,对其在不同温度条件下的谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)活性进行了测定,旨在掌握不同温度条件下赤眼蜂对农药的抵抗能力,并为赤眼蜂的应用提供基础数据。
1.1.1 供试昆虫
松毛虫赤眼蜂(采自黑龙江省牡丹江市郊区),在25℃±1℃、75%RH、16L∶8D组合条件下,繁育保种3代以上。将新羽化的松毛虫赤眼蜂成虫在15℃、25℃、35℃3个温度梯度下分别处理6 h。
1.1.2 供试寄住
取自本实验室用麦麸+大豆粉饲养的米蛾实验种群。每日收集当日新产的米蛾卵,经30 w紫外灯、在40 cm处照射40 min杀死胚胎,置于4℃下保存,4 d内使用。
1.1.3药品
①0.2 M 磷酸缓冲液(pH 7.0)。
A液 : 0.2 M Na2HP04溶液:称量Na2HP04·12H2O 35.8 g,溶于蒸馏水中, 定容至500 ml。
B液 : 0.2 M NaH2P04溶液:称量NaH2PO4·2H20 15.6 g,溶于蒸馏水中,定容至500 ml,将 A液和B液按61∶ 39 (V/V)混合,即成0.2 M磷酸缓冲液。
②0.04 M 磷酸缓冲液(pH7.0)
量取100 ml0.2 M磷酸缓冲液(pH7.0),加入400 ml蒸馏水即成。
1.2.1 酶源制备
取适量松毛虫赤眼蜂成蜂,置于1 ml0.04 M磷酸缓冲液中,在冰浴下匀浆,10 800 r·min-1离心20 min,取上清作为酶源。
1.2.2 谷胱甘肽硫转移酶活性测定方法……p>