氯化锂介导经典Wnt/β-catenin信号通路在大鼠脂肪干细胞增殖和成骨中的作用

赵 璇，徐 燕，郑桂婷，沈继龙

氯化锂介导经典Wnt/β-catenin信号通路在大鼠脂肪干细胞增殖和成骨中的作用

赵 璇1，徐 燕1，郑桂婷1，沈继龙2

目的 探讨在体外生长环境下不同浓度氯化锂对脂肪干细胞（ADSCs）增殖和成骨分化的作用及其可能的机制。方法 ①从3周龄SD大鼠腹股沟脂垫分离出脂肪组织，使用0.1%Ⅰ型胶原酶消化后置于含10%胎牛血清DMEM培养，以 0、2.5、5、10、20、40 mmol/L 浓度的氯化锂作用 ADSCs 24、48、72 h，用 MTT法测定氯化锂对细胞增殖的作用;②ADSCs加入含0、2.5、5、10、20、40 mmol/L 氯化锂的成骨培养液中培养7 d后测定细胞中碱性磷酸酶（AKP）的活性;③用RT-PCR法检测成骨诱导3 d后，不同浓度氯化锂作用7 d时ADSCs中β-catenin、糖原合成激酶3β、AKP的表达。结果

在体外环境培养下，低浓度氯化锂（2.5、5、10 mmol/L）促进干细胞增殖，高浓度氯化锂（20、40 mmol/L）抑制细胞增殖。5、10 mmol/L氯化锂促进ADSCs中AKP的活性，但是40 mmol/L具有明显抑制AKP活性的作用。同时，氯化锂能上调β-catenin和AKP的表达。结论 氯化锂在体外对大鼠ADSCs增殖有双重影响，并且促进AKP活性和ADSCs成骨分化，具有剂量依赖性。5 mmol/L 浓度的氯化锂可作为促进大鼠ADSCs增殖和成骨分化的最适浓度。

Wnt信号通路;脂肪干细胞;氯化锂;增殖;成骨分化

脂肪干细胞（adiposed-derived stem cell，ADSCs）由 Zuk et al［1］于2001年发现，因其易取得、储量丰富性、自我增殖和多向分化的能力强等特点在牙周组织工程中引起关注［2］。Wnt信号通路参与细胞的增殖、分化、迁移、基因表达等各项活动［3］，特别是经典的Wnt/β-catenin信号通路更是对干细胞的增殖和分化起到关键性的作用。该研究旨在使用不同浓度氯化锂对ADSCs进行刺激，探讨经典Wnt/βcatenin通路对于ADSCs增殖和成骨向分化的作用以及可能的机制。……