改良酚/氯仿法结合miniSTR分型技术检验陈旧骨痕量DNA

徐 凯，徐国昌 ，张 玥，任 甫

·法医学·

改良酚/氯仿法结合miniSTR分型技术检验陈旧骨痕量DNA

徐 凯1，徐国昌2，张 玥3，任 甫4

目的建立5个miniSTR基因座的复合扩增系统，提高STR基因座对陈旧骨检材的个体识别效能。方法新设5个STR基因座的引物，分别用FAM、TAMRA、TET标记D3S3053、D18S853、D12ATA63、D6S474、D9S1122，通过PCR扩增，利用ABI3100xL遗传分析仪进行片段长度分析，对84份河南汉族无关个体血样，以及25例陈旧骨检材进行检测。结果5个基因座均得到有效扩增，在河南汉族人群中5个miniSTR基因座个体识别能力DP为0.8768～0.9623，杂合度H为0.7454～0.8934，多态信息含量PIC为0.7145～0.8214。5个miniSTR基因座总DP值为0.999 996 72。用Identifil试剂盒及miniSTR技术对25份陈旧骨检材的位点检出率分别为60.25%和84.80%。结论上述5个miniSTR基因座在河南汉族人群中等位基因分布较好，个体识别能力高，适用于个人识别和亲权鉴定，同时为陈旧骨痕量DNA样本分型提供了一种新的检测方法。

miniSTR；遗传多态性；陈旧骨

由于PCR扩增高度多态性的STR基因座是法医学领域目前用于亲子鉴定和个人识别的主流技术，在时间较久的埋尸、溺水等案件和考古人类学中，机体的软组织大部分被毁和降解，无法应用常规检材进行个体识别。因此，不断寻找新的STR基因座仍然非常重要。骨骼作为一类特殊的检材，相对于人体的其他组织抗腐败能力强且保存时间长[1]，故其在上述系列案件和研究中对于个体识别起到越来越重要的作用。陈旧骨DNA的检出率受时间、环境等因素的影响，时间越久远、环境越极端，DNA检出成功率越低，甚至失去了检材的应用价值。MiniSTR技术设计的引物更靠近核心重复序列，因此产生的STR等位基因片断长度更短，分型成功率获得很大提高[2]。……