老年大鼠脊髓腰骶段NADPH-d阳性体的表达及睾酮对其影响

徐彦楠 周晨明 张国梁 车 静 石葛明

(河北医科大学细胞生物教研室，河北 石家庄 050017)

脊髓腰骶段主要控制大肠、盆底肌和生殖器官的功能〔1〕。在衰老的过程中，脊髓腰骶段呈现与年龄相关的衰老性变化，同时也出现肠、膀胱和生殖器官等盆腔脏器的器质性和功能性改变。一氧化氮(NO) 是一种重要的神经信息物质，在外周和中枢神经系统中起着重要的信号转导作用〔2〕。有研究显示盆腔脏器的功能或器质异常可能与老年脊髓腰骶段的NO表达改变有关〔3〕。在衰老的过程中脊髓腰骶段的出现NO表达变化，特别是还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸黄递酶(NADPH-d)阳性体的表达改变〔3〕。机体衰老体内性激素减少，NO特别是NADPH-d阳性体的表达变化是否与体内性激素的减少有关目前尚无定论。本实验拟NADPH-d组织化学法，观察老年大鼠脊髓腰骶段NADPH-d阳性体的表达及鼻腔给予睾酮后对其的影响。

1 材料与方法

1.1实验分组和动物模型 选取6月龄和21月龄健康雄性Wistar大鼠15只，由河北医科大学动物实验中心提供。大鼠分为6月龄组、21月龄组和21月龄滴鼻组，每月龄组5只。6月龄组和21月龄组鼻腔给予芝麻油(2 mg/kg)，21月龄滴鼻组鼻腔给予睾酮(2 mg/kg)，连续给药3个月(6月龄组从3月龄时开始给药，21月龄组和21月龄滴鼻组从18月龄开始给药)。

1.2灌注切片 所有大鼠经10%水合氯醛(0.3 ml/100 g)腹腔注射麻醉后，经左心室灌注固定，取出脊髓后固定4 h(4℃)。取脊髓腰骶段(L6-S1)后置入30%的蔗糖中过夜。在恒冷切片机上进行连续切片，片厚40 μm。

1.3染色 将切片在0.1 mol/L PB缓冲液漂洗两次后。……