王丹丹 汲 军 项柏冬
(长春医学高等专科学校,吉林 长春 130031)
肝癌在肿瘤发病率中位列第三。确诊时常常已到晚期,预后差,严重威胁着人类健康。常用的放化疗手段有一定疗效,但常给机体带来严重的副作用。因此,寻找高效低毒的化疗药物,和毒副作用小的纯中药制剂来辅助治疗肝癌成为国内外学者研究的热点。姜黄素(CUR)是从姜黄中提取的天然药物成分,其药理作用广泛,主要有抗炎、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、脂质过氧化、抗病毒等〔1〕。它具有毒副作用低、价格低廉等优点。许多动物体内实验证实,CUR可抑制胃癌、皮肤癌、结肠癌等癌症的发生,具有明显的抗肿瘤效果。本文主要研究CUR在体外对人肝癌细胞株(HepG-2)的抑制效果,探讨CUR的抗肿瘤活性,以期为CUR的体内活性及临床应用研究提供理论基础。
1.1仪器、试剂、药品 Bio-RAD550全自动酶标仪:美国伯乐公司;台式高速低温离心机5810R型:德国Eppendorf公司;二氧化碳培养箱:美国Forma公司;电子天平:北京赛多利斯有限公司;Olympus倒置相差显微镜:日本Olympus公司;四甲基偶氮唑盐(MTT):美国Sigma公司。RPMI-1640培养基:Gibco公司;小牛血清(FBS):杭州四季青生物工程材料有限公司;无水二甲基亚砜(DMSO):分析纯,美国Sigma公司;胰酶:美国Sigma公司;吉姆萨染液:德国AppliChem公司;姜黄素(含量>80%):美国Sigma公司。细胞株:HepG-2购买于上海生物制品研究所,液氮中冻存保种。
1.2方法
1.2.1细胞培养 将HepG-2接种于含双抗的RPMI-1640培养基并加入FBS培养,置于5%CO2饱和湿度、37.5℃的恒温培养箱中培养24 h后即进入对数生长期,接种后72 h后细胞贴壁生长,用0.25%胰酶将贴壁生长的细胞用直接吹打法传代,每1~2 d更换1次培养基,选择对数生长期细胞用于实验。……p>