益气温阳活血方含药血清对大鼠肥大心肌细胞原癌基因c-fos、c-myc表达的影响

李春陵 顾广富 罗建华 杨冬花

(贵州省人民医院干医科，贵州 贵阳 50002)

持续的交感神经过度激活是慢性心力衰竭的重要特征，也是心室重塑和病情恶化的重要促进因子〔1〕。c-fos、c-myc是调控细胞增殖的相关原癌基因，通过调控肥大晚期基因的表达，导致心肌细胞蛋白质合成增加，蛋白表型向胚胎型转化〔2〕。益气温阳活血方在心力衰竭早期可通过PPARγ信号通路调节血管紧张素(Ang)Ⅱ、醛固酮的表达，防止心室重塑，改善心脏功能〔3〕，但是否能通过抑制c-fos、c-myc的表达防止心室重塑，目前尚不清楚。本研究益气温阳活血方对肥大心肌细胞c-fos、c-myc表达的影响。

1 材料和方法

1.1实验动物 健康Wistar大鼠30只，体重(250±10)g，雌雄各半；Wistar乳鼠40只，新生2 d左右，雌雄不拘，由贵阳医学院实验动物学部提供。

1.2益气温阳活血方组成 人参30 g，黄芪30 g，桂枝9 g，丹参30 g，益母草30 g，红花6 g，白术15 g，泽泻9 g，茯苓15 g，葶苈子9 g，炙甘草6 g等11味中药，药材从贵州省人民医院中药房一次性选购，生药按比例取好，加水浸泡1 h，第1遍煮沸40 min，滤渣取汁，再加水煮沸15 min，滤渣取汁，合并2次煎液，在水浴中浓缩至每毫升煎液含生药4 g，保存备用。

1.3试剂 卡维地洛(齐鲁制药有限公司，批号：H20000100)，胎牛血清(GIBCO公司)，AngⅡ(Sigma公司)，1640培养基、胰酶(Sigma公司)，大鼠Anti-c-fos抗体、大鼠Anti-c-myc抗体(Santa Cruz公司)，ECL显影试剂盒(Santa Cruz 公司)，AD、NE(IBL公司)，制胶、电泳及转膜仪(Bio-Rad公司)。

1.4含药血清制备 大鼠分为中药组10只，予益气温阳活血方(8 ml/kg)灌胃治疗；卡维地洛组10只，予卡维地洛(50 mg·kg-1·8 ml-1蒸馏水)灌胃治疗；空白血清组10只，予蒸馏水(8 ml/kg)灌胃。均每日给药2次，共8 w。末次灌胃后1 h颈动脉采血处死动物，分离血清。……