Livin与Smac/DIABLO在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

元建华 彭大为 李建旺 王美清

肿瘤的发生、发展与细胞凋亡的紊乱密切相关。凋亡受抑制将导致细胞存活时间延长，有利于转化突变的细胞生长积累，最终导致肿瘤的产生。细胞凋亡受多条通路和多种因子的调控。Livin 蛋白是凋亡抑制蛋白家族(inhibitor of apoptosis protein，IAP)成员之一，在人体的大多数正常组织中不表达或低表达，而在大多数恶性肿瘤中高表达，并使肿瘤细胞对缺血、缺氧、化学治疗及放射治疗等产生耐受[1-2]。第二个线粒体来源的半胱氨酸酶的激活剂(second mitochondria-derived activator of caspase/direct IAP-binding protein with low PI，Smac/DIABLO)是1种重要的促凋亡因子，可以与IAPs成员结合，解除IAPs对含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspar-tate specific proteinase，Caspase)的抑制从而促进细胞凋亡[3]，因此Smac/DIABLO蛋白在肿瘤细胞凋亡中有着极其重要的作用。本研究采用免疫组化方法，检测 100例结直肠癌患者中Livin蛋白、Smac/DIABLO蛋白的表达情况，以了解它们在结直肠癌中的表达情况及其临床意义。

1 材料与方法

1.1 临床资料

收集2006年1月至2009年12月海口市人民医院收治的100 例初治结直肠癌患者的术后组织标本，所有患者均行根治性手术，术后定期随访。患者均具有完整随访资料，转移复发情况明确。末次随访时间为 2013 年 6 月。其中男性54例，女性46例，男女比例为1.17∶1；年龄23～74岁，中位年龄 54 岁；肿瘤直径<5 cm 49例，≥5 cm 51例。TNM分期采用AJCC第七版分期：Ⅰ+Ⅱ期 48例，Ⅲ期 52例。肿瘤浸润深度：T1+T2期12例，T3期88例。组织学分类：高分化25例，中分化64例，低分化11例。所有病例术前未接受过任何抗癌治疗。30 例正常对照标本取自经病理检查证实无肿瘤残留的结直肠癌手术切除标本的切缘。

1.2 免疫组化SP法

取上述 130 例石蜡包埋标本，常规制备 4 μm厚切片，常规二甲苯脱蜡，3% H2O2阻断内源性过氧化物酶及微波抗原修复后，滴加一抗及二抗，DAB染色，苏木精复染。一抗为兔抗人Livin多克隆抗体(稀释浓度为1∶100)、兔抗人Smac/DIABLO多克隆抗体(稀释浓度为1∶200)，均购自美国ProSci生物技术公司。……