林称意 原 野 罗卫民 郭家龙
食管癌属于十大常见的恶性肿瘤之一,但癌前病变具有双向发展的不稳定性生物学特征,可向癌的方向发展或维持多年不变,也可退回到较轻度的病变,早预防、早诊断及早治疗具有重要意义。我们分析TSLC1和CD105在食管癌组织中的表达,探讨其在食管癌发生发展中的作用,现报告如下。
选择我院收治的86例通过手术切除并经病理证实为食管癌的患者,术前未进行任何抗癌治疗。男性51例,女性35例,年龄43~71岁,平均(60.8±5.6)岁;23例患者肿瘤仅浸润浅肌层、黏膜层或黏膜下层,63例患者肿瘤浸润至深肌层或外膜层;患者中伴淋巴结转移38例,无淋巴结转移者48例;病理分级:低分化24例,中分化32例,高分化30例。病理分期按照国际TNM分期标准:Ⅰ期11例,Ⅱ期25例,Ⅲ期40例,Ⅳ期10例。
鼠抗人CD105单克隆抗体(购自福州迈新公司);SP试剂盒和DAB显色剂(购自北京中杉金桥公司);双目显微镜、显微照相仪(日本Olympus公司);电热手提式压力蒸汽灭菌器(上海医用核子仪器厂)。
1.3.1 免疫组织化学检测法 取食管癌患者癌组织和癌旁正常组织进行脱蜡水化,使用胰蛋白酶消化抗原行CD105修复。然后PBS洗3次×5 min,室温下3% H2O2溶液孵育10 min,滴加PBS液稀释的一抗(CD105:1∶15),放置于4℃冰箱孵育过夜,再次PBS清洗后滴加生物素化二抗工作液,室温下孵育20 min,滴加辣根过氧化物酶标记链霉卵白素工作液孵育20 min,之后DAB底物显色,梯度酒精脱水,中性树胶封固。
1.3.2 阳性判定标准 随机选取每张切片中的10个高倍视野(400倍),在每个高倍视野中计数200个细胞,根据阳性细胞染色强度计数阳性细胞百分数。……