张洪涛 张静宇 张炳团 王 铮 李少文
BC369治疗小鼠L1210白血病有明显效果[1]。为此,我们采用BC369对小鼠鼠源性肾癌(REN-ca)进行实验研究,进一步观察BC369对小鼠肾癌生长的影响。
Baib/C近交系健康小鼠、体重(17±2)g,雌雄兼半(雌未孕),共30只,由中国医学科学院实验动物研究所购进,二级实验动物,合格证为SCXK(京)2008-0001,实验动物使用许可证号SYXK(京)2008-0016。
肾癌细胞系(Ren-Ca)由中国医学科学院肿瘤研究所提供。
肾癌(Ren-Ca)离体细胞系液氮复苏后,经多次传代培养,消化离心,以107/ml 的细胞浓度(0.2 ml)接种于健康Baib/C小鼠皮下,15天后形成1 cm大小的实体肿瘤,断颈处死小鼠,70%酒精浸泡1 min,无菌条件下剥离肿瘤,剪成1 mm3大小的组织块,选择新鲜无坏死的肿瘤组织,用生理盐水洗五遍,组织匀浆器轻轻研磨至细胞悬液,150目细胞筛过滤,活瘤细胞计数,配置瘤细胞悬液,细胞浓度为1×107/ml,于每只鼠右侧腋窝皮下接种0.1 ml(1×106/ml)瘤细胞悬液。
BC369为天津市泽世德生物医药有限公司试制,1 mg/瓶,-20 ℃保存,注射时用1 ml无菌生理盐水溶解。环磷酰胺(CTX)系上海第十二制药厂生产,100 mg/支。
接种肿瘤细胞次日将30只小鼠随机分为三组,每组10只,阴性对照组(NS)10只,阳性对照组(CTX)10只,创新药组(BC369)10只;记录每组小鼠体重。
接种肿瘤细胞后次日开始给药,每天一次,共10次,每组小鼠均为腹腔注射。NS组:25 ml/kg,即每只小鼠每天腹腔注射生理盐水0.5 ml,10次。CTX组:25 mg(25 ml)/kg,即每只小鼠每天腹腔注射环磷酰胺注射液0.5 mg(0.5 ml)/次,10次。BC369组:25 mk(25 ml)/kg,即每只小鼠每天注射BC369注射液0.5 mg(0.5 ml)/次,10次。
终止治疗后次日,称各组小鼠体重,然后断颈处死,剥离肿瘤体称重。……