早期胃癌中原代细胞ssDNA适配子检测的临床意义

徐 攀 马 驰 张雪燕 杨晓娟 蒋 丹 聂登梅 刘 昕 韩跃武

目前胃癌临床治疗主要以手术治疗为主，根据近年来的临床调查结果显示[1-2]，中晚期胃癌患者其术后的生存状况并不理想，因此早期胃癌的诊断对患者的疗效以及术后的生存状况有着重要的意义。本研究通过建立早期胃癌原代细胞ssDNA适配子的检测方法并进行临床评价，同时对其作为诊断早期胃癌标准的诊断性能进行分析，旨在建立积极有效且适用于基层医院的检测方法，为临床早期胃癌诊断提供依据。

1 材料与方法

1.1 研究方法[3-6]

1.1.1 早期胃腺癌细胞表面特异标志物(靶物质)的捕获、分离 ①早期胃腺癌细胞表面靶物质的分离提取：采取数例早期胃腺癌组织标本，利用原代细胞分离、纯化方法及生物素——链酶亲和素磁珠方法，分离提取与生物素化的适配子特异性结合的靶物质(即膜分子标志物)。②采用层析法分离、纯化得到目标靶物质——分子标志物：首先对上一步提取的靶物质进行SDS-PAGE电泳，以正常胃黏膜细胞膜提取物作为对照，确定早期胃腺癌原代细胞靶物质的大致分子量。

1.1.2 标志物的分析与鉴定 ①应用常规方法确定分子标志物化学属性(即是糖蛋白、脂蛋白还是糖脂等)：应用高碘酸-硝酸银染色法鉴定电泳凝胶中的糖蛋白；运用琼脂糖凝胶电泳，进行油红O染色和氨基黑10B染色可以鉴定脂蛋白；采用5-甲基间苯二酚显色，加热糖脂可显出紫红色。②运用电泳、层析及HPLC方法纯化5种靶物质，确保达到质谱分析所要求的纯度：利用质谱检测，经NCBInr数据库搜寻进行比对分析，确定所获得的分子标志物的理论分子量、等电点及结构等基本参数。……