IL-6对胃癌细胞株上皮间质转化的作用

刘 俊 杨 林

胃癌居我国恶性肿瘤发病率之首，早期胃癌的预后较好，但随着胃癌的进展，肿瘤细胞的侵袭和转移能力不断增加，预后也越来越差。报道指出，上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition，EMT)是上皮细胞基因发生转变的过程，是赋予肿瘤细胞转移能力的重要环节[1]。有学者发现，多种恶性肿瘤的EMT过程均伴有细胞因子的参与[2]，为进行进一步研究，我们对白细胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)对胃癌的EMT影响过程进行了观察，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

人胃癌细胞株(未分化)HGC-27(上海拜力生物科技有限公司)，IL-6试剂盒(深圳晶美生物工程有限公司)，鼠抗人E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、β-actin单克隆抗体(巴傲得生物科技有限公司)，Trizol试剂(Invitrogen公司)，逆转录PCR试剂盒(Genecopoeia公司)，荧光定量PCR试剂盒、BCA法微量蛋白质浓度测量试剂盒(生工生物工程(上海)股份有限公司)，DMEM培养基、胎牛血清(FBS)(Hyclone公司)，Rotor Gene 6000荧光定量 PCR仪(德国凯杰公司)，核酸蛋白质测定仪(Eppendorf公司)。

1.2 实验方法

取HGC-27细胞株，平均分为2组，分别为观察组及对照组。2组在常规培养后，观察组额外接受IL-6培养，培养浓度为50 ng/ml，培养时间为3 d，培养环境为37 ℃、5%CO2。

1.3 观察指标

首先在光学显微镜下，观察2组细胞培养后形态学变化，并采取逆转录法及荧光定量RT-PCR法[3]，观察EMT标志分子的变化，包括细胞表面蛋白(E-cadherin、N-cadherin)及细胞骨架蛋白(Vimentin)，分析IL-6对观察组细胞株EMT的作用。

1.4 统计学分析

对本研究的所有数据采用SPSS 13.0进行分析，对计量资料采用t检验，检验水准设定为α=0.05，当P<0.05时，认为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 IL-6处理后细胞形态学变化

显微镜观察经IL-6处理后，观察组细胞连接疏松，多边样形态消失，部分细胞呈梭形(图1-B)，而对照组细胞未见明显改变，仍具有紧密的细胞连接(图1-A)。……