LIMK1表达与结肠癌患者临床病理特征的关系

王晓英 屈昌民 梁淑文 李连勇 宫淑娟 翟静妤 王宝艳

结肠癌(colon cancer)是消化系统的常见恶性肿瘤，发病率和死亡率均呈逐年上升的趋势。寻找结肠癌浸润、侵袭和转移的分子机理，寻找关键标记，对早期诊断、靶向干预治疗和预后判断有非常重要的意义。有大量报道表明[1]，LIM激酶(LIM kinase,LIMK)在胃癌、前列腺癌和肝癌等恶性肿瘤组织中均有高度表达，但尚无明确的结肠癌研究报告。我们通过自制组织芯片技术检测LIMK1蛋白在结肠癌组织中的表达，从而研究其临床病理价值。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2010-2013年本院行外科手术切除的结肠癌组织68例、上皮内瘤变17例以及远离结肠癌的正常组织标本31例，合计116例。全部患者术前都行HE病理组织活检得到确诊，且尚未接受放、化疗治疗。结肠癌患者中男性43例，女性25例，≥65岁者42例，<65岁者26例；低分化腺癌21例，中分化腺癌43例，高分化腺癌4例；TNM分期：Ⅲ期及以上者37例，Ⅰ+Ⅱ期31例；肿块直径<3 cm者24例，≥3 cm者44例；无淋巴结转移33例，淋巴结转移35例。

1.2 组织芯片制作

依据HE病理组织切片确定有代表价值的典型病变部位，自制组织芯片。采用Beecher Instruments生产的组织芯片仪和2 mm组织穿刺针。基本流程大致如下：①制备组织芯片模块：将蜂蜡和莱卡石蜡以7∶3的比例混合起来，制备成2.2 cm×3.5 cm×1.0 cm的蜡块，同时设计5×10点组织列阵，并通过芯片仪打孔做成带孔的空白蜡块。②制备组织芯片：在40～41 ℃水浴中软化蜡块2 min，选取病变部位，逐步拿出2 mm×3 mm的组织柱，并相继推入预先设计的空白蜡块孔内，排列成组织芯片，并将组织芯片面朝下置于玻片上，在37 ℃恒温中静置半小时，轻轻按压玻片使得组织柱能够在模块中排列平整。

1.3 免疫组化染色

使用美国ABZOOM公司生产……