纤维连接蛋白表达与骨肉瘤肺转移的相关性研究

周 琰 张 星 陆志刚 姚 阳

骨肉瘤(osteosarcoma,OS)是源于间叶组织以能产生骨样组织的梭形基质细胞为特征的恶性肿瘤，占原发性骨恶性肿瘤的首位[1]。OS好发于青少年，恶性度高，进展迅速，常早期发生血行或淋巴结转移，预后差。随着新辅助化疗等的应用，患者5年生存率有所提高，已从上个世纪70年代的10%～15%提高到目前的50%～70%[2-3]。影响骨肉瘤转归最主要的原因是其转移率极高，而肺是最常见器官，一旦发生转移患者的5年生存率显著降低不足20%。近年许多学者着重研究与骨肉瘤预后相关的分子途径，本研究关注了细胞外基质的重要组分——纤维连结蛋白(fibronectin,FN)。FN最初是在培养的鸡胚成纤维细胞上发现的1种纤维细胞表面抗原，主要作用是介导细胞与细胞、细胞与基质粘连结合，促进细胞分化、定向迁移。FN在骨肉瘤组织中的表达及其与预后的相关性的相关研究较少。本研究旨在探讨FN表达与骨肉瘤肺转移的相关性。

1 材料与方法

1.1 临床资料

收集自2010年1月至2012年1月上海市第六人民医院收治的、经病理活检确诊为初发骨肉瘤病例36例，均为保肢术后接受了一线大剂量密集MTX、ADM+DDP、IFO方案交替化疗12个疗程，化疗结束后门诊随访2年，肺转移18例，男性11例，女性7例，中位年龄14.6岁。无肺转移18例，男性10例，女性8例，中位年龄13.3岁。

1.2 主要试剂

兔抗人FN多克隆抗体，SP免疫组化试剂盒，DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物技术公司。

1.3 免疫组织化学检测法

石蜡标本制成4 μm厚切片，常规二甲苯脱蜡、梯度酒精水化后，浸入3%H2O2溶液中，室温下孵育10 min，以阻断内源性过氧化物酶的活性，PBS冲洗，3 min×3次。……