流式细胞术检测急性髓细胞白血病微小残留病的临床价值

何正梅 陶善东 邓 媛 于 亮

白血病属于造血干细胞恶性克隆性疾病,死亡率较高,临床治疗难度较大,急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)属于白血病的一种常见类型[1]。近几年研究发现微小残留病(minimal residual disease,MRD)与白血病复发有紧密联系，但其在人体内分布和生存特点较为复杂,尤其是MRD增殖受机体免疫情况影响较大[2]。因此,准确、快速检测MRD成为了关注的热点。我院采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)对66例AML患者诱导化疗前后的各亚型髓系抗原阳性表达情况进行了检测和分析,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2012年6月至2013年6月我院收治的66例初治AML患者作为研究对象。所有患者均符合AML的诊断标准(依据细胞形态学、分子生物学、遗传学及免疫学确立诊断[3])。患者年龄为14～70岁,平均年龄为(37.22±8.33)岁,按照法美英(French-American-British,FAB)分型标准[4]进行分型,M2型40例,M3型18例,M4型6例,M5型2例。按照诱导化疗结束时患者临床疗效,将66例患者分为缓解组46例和未缓解组20例。选取我院同期收治的20例缺铁性贫血患者骨髓作为对照组,其中男性9例,女性11例,年龄为14～72岁,平均年龄为(47.05±8.77)岁,髓系抗原总阳性表达率为(0.69±0.25)%。

1.2 方法

使用COULTER®EPICS®ALTRATM流式细胞仪(美国)采用免疫荧光标记法对白血病免疫表型进行检测,单克隆抗体9种,包括MPO、CD117、CD13、CD33、CD14、CD15、CD11b、HLA-DR、CD34[5],均购自美国Beckman-Coulter公司,采用CD45/SSC散点图设门。细胞膜抗原阳性判断标准：荧光阳性细胞>20%；CD34、CD38和胞浆抗原阳性判断标准：荧光阳性细胞>10%；MRD阳性判断标准：总阳性表达率显著高于对照组即为MRD阳性[6]。

1.3 观察指标

记录初诊时与诱导化疗结束时AML患者各亚型髓系抗原阳性表达情况,比较诱导化疗结束时缓解组、未缓解组及对照组患者髓系抗原总阳性表达率。