延胡索不同炮制方法的薄层色谱鉴别对比研究

王彦青

（郑州市第八人民医院药剂科，河南 郑州 450000）

延胡索是一种中国传统药材，为罂粟科植物延胡索的干燥块茎，又称元胡或玄胡。延胡索中含有多种生物碱，主要有延胡索乙素（dltetrahydropalmatine）、延胡索甲素（d-corydaline）和延胡索丙素（protopine）等，是临床上常用的活血、止痛药，具有活血、行气、止痛等功能[1]。目前临床上常用的延胡索是经炮制后的延胡索，研究结果表明[2]，醋炙后的延胡索能提高它的行血、止痛作用，而酒炙后的延胡索能增强其活血、化瘀的功能。本文以延胡索的主要有效成分延胡索乙素为研究对象，采用超声法提取经不同方法炮制过后的延胡索中的有效成分，并应用薄层色谱法对有效成分进行鉴别和对比分析，以确定最佳的炮制方法，为延胡索的炮制及有效应用提供参考和依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

全自动薄层铺板器（TD-Ⅱ型，上海科哲生化科技有限公司），超级循环水箱（HH-501型，金坛市鸿科仪器厂），台式超声波清洗器（KQ2200V型，昆山舒美超声仪器有限公司），暗箱式微型双光紫外分析仪（GL-200型，江苏海门其林贝尔仪器制造有限公司），恒温干燥箱（DHG-101-3A型，天津诺宏仪器制造有限公司），电子分析天平（CP225D型，德国赛多利斯科学仪器有限公司）

1.2 试药

硅胶G（青岛海洋化工有限公司），延胡索（天津中新药业药材公司，批号：070912）； 延胡索乙素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110726-201112），山西老陈醋（山西老陈醋集团），黄酒（绍兴花雕），其他所有试剂均为分析纯，水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 炮制方法

首先将延胡索洗净，将其干燥后打碎，再采用醋烘、醋煮、醋炙、酒炙的方法分别对其进行炮制。其中，①醋烘：称取延胡索适量，加入20%总质量的醋将其润湿，待醋完全吸尽后，放入120 ℃的烘箱内干燥45 min，随后取出来放凉，备用；②醋煮：称取延胡索适量，加20%总重量的醋将其润湿，待醋完全吸尽后，再加入纯化水将药材浸没，随后用武火煮沸，再用文火煎煮，干燥备用；③醋炙：称取延胡索适量，加入20%的醋润湿，待醋完全吸尽后，以文火炒干，放凉后，备用；④酒炙：称取延胡索适量，加20%的酒润湿，闷透后，以文火炒干，放凉后，备用。

2.2 对照品溶液的制备

称取延胡索乙素对照品10.5 mg，置于10 mL的容量瓶中，加少量甲醇溶解后，然后继续用甲醇定容至刻度，混合均匀后，即得1.1 mg/mL的延胡索对照溶液，将其放置于冰箱中保存，备用。

2.3 供试品溶液的制备

取上述炮制后的延胡索及延胡索生品各取5 g，置于锥形瓶中，加入纯化水100 mL，超声提取25 min后，分离上清液，收集；然后将残渣再重复上述操作1 次，合并2次的滤液；接着残渣加入50 mL的水溶解后，再加10 mL浓氨水，然后乙醚萃取3 次，合并萃取液，蒸干；称取0.2 g浓缩物，用2 mL甲醇溶解，混合均匀，即得供试品溶液，于冰箱中保存，备用。

2.4 薄层色谱的点样、展开及处理

预先采用2%（W/V）的氢氧化钠溶液制备硅胶G薄层板，然后将“2.2”项下的对照品和“2.3”项下的供试品溶液经点样器点于硅胶薄层板上（S为延胡索乙素对照品溶液，其余按标号为不同炮制方法的供试品溶液），展开剂为甲苯-丙酮（9∶2），展距7 cm。随后取出薄层板，待晾干后，将其放置于密闭的碘缸中约5 min，取出，挥尽薄层板上所吸附的碘，最后放于紫外光灯（波长为365 nm）下，检视，结果见图1所示。

图1 不同炮制方法下的延胡索的薄层色谱图

从薄层色谱图上可以看出，所有供试品的斑点均与对照品的斑点出现在同一位置上，且呈现出相同颜色的荧光。但未经炮制的延胡索生品（9、10号）较其他炮制后的延胡索来说，斑点稍小且颜色稍浅，而经醋烘、醋煮、醋炙、酒炙炮制后的延胡索中，斑点最大且最亮的为醋炙（5、6号）后的供试品溶液，其次为酒炙、醋烘、醋煮后的延胡索斑点。

3 讨论

传统的延胡索炮制方法主要有醋炙、醋烘、醋煮和洒炙等，目前，关于这些不同的炮制方法对延胡索中延胡索乙素影响的研究报道有许多，如许捷[3]曾用醋炙、醋煮、醋烘、酒炙的方法炮制延胡索，并采用高效液相色谱法测定炮制后延胡索中延胡索乙素的含量，结果发现醋炙和酒炙这2种方法炮制后的延胡索中延胡索乙素含量较醋煮和醋烘高，而未经任何炮制处理后的延胡索中延胡索乙素含量最低[4]。本研究通过薄层色谱分析也证实，醋炙延胡索、酒煮延胡索所、醋烘延胡索及酒炙延胡索后得到的斑点较延胡索生品的斑点大且颜色亮，且斑点的位置均与延胡索乙素对照品的薄层色谱位置一致，说明经过炮制后，延胡索中的有效成分延胡索乙素含量有所提高，这可能是因为延胡索中的生物碱大多都是以游离态的形式存在，而游离态的生物碱却难溶于水，但经过醋制或酒制后，可能会形成生物碱的盐类，而使其的溶解度增加，进而提高含量，使斑点变大且增亮。还有可能是因为延胡索经醋炙和酒炙后，改变了延胡索中有效成分的结构，有利于有效成分的浸润、溶解、扩散，从而增强了延胡索乙素的溶出[5]。

醋煮炮制方法下延胡素的斑点较小较暗，提示该种炮制方法下得到的延胡索中乙素含量较低，其原因的可能是因为煮的时间过长，破坏了生物碱的结构，进而影响了其含量，所以在采用醋煮的方法对延胡索进行炮制时，需注意煮的时间，以免破坏了有效成分的结构。而醋炙后的斑点最大最亮，提示此炮制方法下得到的延胡索乙素含量最高，该种方法是一种较为合适的延胡索的炮制方法，但在采用该种方法炮制延胡索时，需严格掌握火候，因延胡索大小不一，若火力较大，则会出现受热不均，炒制过渡，进而影响饮片的质量[6]。

总而言之，延胡索是中医临床上常用的药材，通常需经炮制后再入药，然而，由于多种炮制方法存在较大的差异，因此选择一种优质的炮制方法就显得尤其重要，本研究采用超声法提取了不同炮制方法后的延胡索乙素，并采用薄层色谱对其进行鉴别和对比研究，结果发现醋炙法是炮制延胡索的最佳方法，该方法操作简便，方法可行，且质量可控，适用于延胡索的炮制，为其临床用药的有效性奠定了基础。

[1]郑弘,许红玮.延胡索不同炮制方法的薄层色谱鉴别对比研究[J].中医学报,2013,28(5):695-696.

[2]沈志冲.元胡不同炮制方法对延胡索乙素含量的影响[J].现代预防医学,2011,38(21): 4454-4455.

[3]徐捷.不同炮制方法对延胡索有效成分影响研究[J].河北医药,2013,35(3): 454-455.

[4]李瑞丽,王喜民,张玉东.薄层色谱法鉴别胃康灵胶囊中白芍、三七和延胡索[J].亚太传统医药,2013,9(3):19-20.

[5]刘霞,张小慧,仝立国,等.胃肠康定胶囊的质量标准研究[J].中药新药与临床药理,2012,23(05):582-585.

[6]付莉,韩桂茹.三种制剂中多味药材的同时鉴别研究[J].中国药事,2012,26(1):69-71.