T-钙黏蛋白高甲基化与肺癌发生、发展关系探讨

王凤玲，隋小芳

(佳木斯大学附属第一医院老年病科，黑龙江佳木斯154003)

近年来学者们研究发现CDH13在多种人类肿痛中表达减少，基因启动子区CpG岛甲基化引起CDH13基因失活可能在肺癌的发生发展中起重要作用。但基因表达下降与甲基化之间关系，以及基因表达改变与肺癌发生、发展的关系仍在探讨中。本研究拟通过检测肺癌组织、良性病变组织和对照组织中CDH13基因水平和表达变化及其甲基化水平和表达改变，结合临床病理资料，分析CDH13基因及其甲基化与肺癌发生、发展的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

实验组：取佳木斯大学附属第一医院及肿瘤医院2011-10～2012-10间排除术前放疗或化疗而手术切除的非小细胞肺癌患者肺组织45例，男29例、女16例，年龄(60±5.9)岁。病理诊断为鳞状细胞癌26例，腺癌19例；有淋巴结转移17例，无转移28例；按TNM分期Ⅰ+Ⅱ期24例、Ⅲ期21例。对照组A：取距离肿瘤组织边缘5cm以上的远癌正常肺组织45例为对照。对照组B：取自同期间内手术的良性病变有10例肺结核球、23例支气管扩张及12例炎性假瘤术中切除的肺组织共45例。

1.2 方法

肺组织标本(良性病变肺组织、肿瘤组织)均为肺叶切除离体后30min内迅速切取，对照组A为取距离肿瘤组织边缘5cm以上的远癌正常肺组织，各自标本分装，液氮速冻，-80℃低温保存［1］。

采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测CDH13基因，取肺组织100mg加入1mL TRIzol研磨，彻底匀浆后分装至EP管1mL/每EP管(组织匀浆量＞100mg时分装)，颠倒混匀10下，室温静置5min，加氯仿1/5体积(0.2mL)，颠倒混匀10下，室温静置5min后4℃，12000rpm，离心15min，转上层水相……