大肠癌组织中BMI-1和MEL-18基因表达的分析

贾雪峰 陈文明 刘 宁

大肠癌是临床常见恶性肿瘤，发病率较高，严重威胁人类健康，多数专家认为该病是一个多步骤、多阶段及多基因共同参与的遗传性疾病[1]。Bmi-1基因和Mel-18基因均属于多梳基因家族，临床研究表明，Bmi-1基因能够与c-myc基因协同作用促进细胞转化和肿瘤形成；Mel-18基因则可抑制c-myc基因转录，加速细胞衰老和肿瘤细胞凋亡[2]。但目前Bmi-l和Mel-18基因在大肠癌中的发病机制尚不明确。现回顾性分析136例结直肠癌标本和136例癌旁正常大肠组织标本中Bmi-l和Mel-18基因的表达情况，探讨这两种基因的异常表达与大肠癌病理学特征的相关性，报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2012年4月至2014年4月我院收治的136例结直肠癌患者手术切除的结直肠癌标本和癌旁正常大肠组织标本作为研究对象。所有标本均在患者知情许可下获取并保存，获取标本时间为患者进行抗肿瘤治疗前。以癌旁正常大肠组织作为对照组，在距癌组织边缘5 cm以上部位获取，以结直肠癌标本作为大肠癌组。两组标本均经10%甲醛固定后进行常规石蜡包埋，4 μm连续切片。

1.2 试剂与方法

试剂：兔抗人多克隆抗体Bmi-1抗体，兔抗人多克隆抗体Mel-18抗体，免疫组化染色试剂盒，DAB显色试剂盒，均购自北京博奥森生物技术有限公司。

方法：免疫组化染色法，链霉菌抗生素素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法。将Bmi-1和Mel-18抗体进行稀释，稀释倍数为100倍，经二氨基联苯胺(DAB)显色后，用苏木精复染[3]。操作均严格按照试剂盒说明书进行。设置阳性和阴性对照，其中阳性对照为已知的Bmi-1、Mel-18和大肠癌组织，阴性对照为PBS液。……