糜蛋白酶微生物限度检查法的验证

王琪

摘 要 目的：对糜蛋白酶微生物限度检查法进行验证。方法：选用适宜的稀释剂溶解糜蛋白酶作为供试液，分别用平皿法与薄膜过滤法对糜蛋白酶进行微生物限度检查法的验证。结果：两种方法的回收率均≥70%。由于薄膜过滤法的取样量是平皿法的10倍，故微生物的检出率高于平皿法。结论：薄膜过滤法适用于糜蛋白酶微生物限度检查。

关键词 糜蛋白酶 微生物限度检查法 回收率

中图分类号：R927.11 文献标识码：B 文章编号：1006-1533（2014）19-0078-03

Validation of microbial limit test method for chymotrypsin

WANG Qi*

（Shanghai NO.1 Biochemical Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shanghai 200240， China）

ABSTRACT Objective： To establish a method for microbial limit tests of chymotrypsin. Methods： An appropriate diluent was selected to dissolve chymotrypsin. The microbial limit were tested by both plate and film methods. Results： Microbial recoveries in two methods were≥70%， which showed that no inhibition of chymotrypsin to microbial growth. Microbial detection rate was higher in the film method than in the plate method since the sampling volume in the film method was 10 times larger than that in the plate method. Conclusion： The film method is suitable for the microbial limit test of chymotrypsin.

KEY WORDS chymotrypsin； microbial limit test； recovery

糜蛋白酶系自牛或猪胰中提取的一种蛋白水解酶，能迅速分解变性蛋白质。作用、用途与胰蛋白酶相似，但比胰蛋白酶分解能力强、毒性低、不良反应小。可使黏稠的痰液稀化，便于咳出，对脓性和非脓性痰液均有效。临床上常用于创伤或手术后伤口愈合等。对糜蛋白酶进行微生物限度检查，能有效发现样品中的微生物污染水平，从而进行微生物风险评估，保证用药安全。

材料和方法

仪器

恒温培养箱（Sanyo MIR253），电子天平（JY-5002型），高压蒸汽灭菌锅（新华XG1.D型、Sanyo MLS-3750），医用电动吸引器（YX940D），生物安全柜（Esco Class II BSC），电热恒温水浴锅（HSY2-SP）。

药品、培养基和试剂

糜蛋白酶原料药（白色或类白色结晶性粉末或无定型粉末，上海第一生化药业有限公司）；营养琼脂培养基（批号：111222）和玫瑰红钠琼脂培养基（批号：110809）购自上海中科昆虫生物技术开发有限公司；硫乙醇酸盐流体培养基（批号：1109262）和改良马丁培养基（批号：111121）购自北京三药科技开发公司；0.9%无菌氯化钠溶液；pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液。培养基在使用前按厂方说明书要求高压灭菌，试剂在使用前于121 ℃灭菌30 min。……