植物组织总RNA提取方法的比较

杨晓娜

【摘 要】本文综述了植物组织总RNA提取方法比较与难点对策分析。植物组织总RNA提取方法有化学试剂提取和试剂盒提取两种。化学试剂提取法有强变性剂法、CTAB法、热硼酸法及改良热硼酸法、LiCl-尿素法、阴离子去污剂法、皂土法、硅藻土-苯酚法。其中，除皂土法和硅藻土-苯酚法是近年提出的较新的植物组织总RNA提取方法外，其余的都被广泛应用。本文可为植物组织总RNA提取方法研究提供参考。

【关键词】植物组织;总RNA提取;方法

RNA是转录水平上研究基因表达与调控机制的载体，是基因操作的重要对象。它主要包括3种：rRNA占82%，tRNA占16%，mRNA占2%[1]。RNA是一类极易降解的分子，要得到完整的RNA，必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解，而且植物组织RNA的提取较动物和微生物困难，如酚类物质氧化后可使RNA 活性丧失[2]，多糖可形成难溶胶状物质与RNA一起被沉淀[3]，所以细胞内RNA分子的多样性和易被降解决定了其提取过程的复杂性。

所有RNA的提取过程都包括以下5个要点：即样品细胞或组织的彻底破碎;有效地使核蛋白复合体变性;对内源RNase的有效抑制;充分地将RNA从DNA和蛋白质混合物中分离;对于多糖含量高的样品还需要将多糖杂质完全除去。其中最关键的是抑制RNase活性[4]。由于RNA的提取对分子生物学的研究至关重要，所以纯度高、浓度高、完整性好的RNA为基因的下游操作例如：Northern杂交、mRNA纯化、互补DNA文库的构建及PT-PCR等提供了良好的保证[5]。

但是，有关植物总RNA提取方法与难点对策分析的总结迄今仍不完整。……