siRNA沉默CD55基因对胰腺癌BxPC-3细胞生物学行为的影响

何 政，吴 慧，万荣华，郑 军

(三峡大学 第一临床医学院 肝胆脾胰外科，湖北 宜昌 443002)

siRNA沉默CD55基因对胰腺癌BxPC-3细胞生物学行为的影响

何 政，吴 慧，万荣华，郑 军*

(三峡大学 第一临床医学院 肝胆脾胰外科，湖北 宜昌 443002)

目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)沉默衰亡加速因子(CD55)基因对胰腺癌细胞增殖的影响。方法针对CD55基因设计3对siRNA，转染胰腺癌BxPC-3细胞，用实时定量PCR和Western blot检测CD55 mRNA和蛋白的表达，并用流式细胞术检测细胞生物学行为的改变。结果转染BxPC-3细胞48 h后，3条siRNA中仅siRNA3能显著抑制CD55 mRNA和蛋白的表达，细胞凋亡比率显著增加(Plt;0.05)；细胞增殖率显著减少(Plt;0.05)；细胞G1/G0期升高，G2期变化不明显，S期下降(Plt;0.05)。结论使用siRNA能够有效地沉默CD55基因的表达，并显著影响胰腺癌细胞的生物学行为。

胰腺癌；RNA干扰；CD55；细胞凋亡；细胞增殖；细胞周期

胰腺癌为常见消化道恶性肿瘤之一，手术根治率较低，且对放化疗均不敏感，胰腺癌根治性手术患者的总体术后的5年生存率lt;5%，迫切需要找到新的治疗策略[1- 3]。CD55基因是本实验室通过基因芯片筛选胰腺癌、癌旁组织找到的差异基因之一，其在多种恶性肿瘤组织及大多数胰腺癌细胞系中过量表达[4- 5]。本实验用小分子干扰RNA(small interference RNA,siRNA)下调人胰腺癌细胞CD55基因表达后观察其对细胞凋亡、细胞周期及细胞增殖的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

胰腺癌BxPC-3细胞(北京肿瘤研究所)；1640培养基(Gibco公司)；3对siRNA设计和合成(广州锐博生物公司)，其中阴性对照序列由广州锐博生物公司持有，不对外公开(表1)；Annexin V-PE/7-AAD 试剂盒(BD公司)；荧光实时定量PCR试剂盒(SYBR® Premix Ex TaqTM)(TaKaRa公司)；……