蜂胶黄酮对人结肠癌细胞PDE4D及Gadd45G基因表达的影响

其曼古丽·吐尔洪，布威海丽且木·阿巴拜科日，祖丽比亚·司马义，买热艳木·艾尔肯，阿达莱提·麦麦提，依米提·热合曼

(新疆大学生命科学与技术学院，乌鲁木齐830046)

近年研究发现，蜂胶中含有多种对肿瘤细胞具有抑制作用的活性成分，如黄酮类及黄酮醇类，可阻滞细胞周期和诱导肿瘤细胞凋亡;蜂胶黄酮(PB3A)具有一定的抗氧化活性［1］。磷酸二酯酶 4D(PDE4D)、DNA损伤诱导基因G(Gadd45G)分别是肿瘤生长的下调基因和上调基因，两者在前期研究基因芯片分析中的差异表达倍数为10倍以上。PDE4D基因是环磷酸腺苷(cAMP)特异性PDE，具有促进肿瘤细胞增殖作用［2～4］;Gadd45G 具有抑制肿瘤细胞增殖和促进其凋亡的作用［5］，其表达缺失可致细胞的无限增殖，从而引起肿瘤发生［6］。2008年1月以来，我们观察了PB3A对结肠癌SW480细胞生长的抑制作用及PDE4D、Gadd45G表达的影响，现分析结果，探讨其作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料 结肠癌SW480细胞购自上海细胞生物学研究所细胞库。RIPA-1640培养基购自Hyclone;胎牛血清购自Gibco;Trizol Reagent购自Invitrogen;cDNA反转录试剂盒购自 Fermentas;PDE4D、Gadd45G及 β-actin引物、SYBR®Premix Ex TaqTMPerfect Real Time和 DEPC购自 TaKaRa公司(大连);辣根酶标记兔抗山羊IgG、PDE4D、Gadd45G、βactin等抗体购自博奥森生物有限公司;protein ladder、BCA蛋白定量试剂盒购自 thermo;蜂胶黄酮PB3A(质量分数≥99%)由依米提·热合曼博士提供。

1.2 细胞培养及分组 结肠癌SW480细胞常规培养与含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中(青霉素100 U/mL，链霉素100 U/mL)，置于37℃、5%CO2培养箱中培养，隔日传代，取处于对数生长期细胞分为PB3A组和对照组。

1.3 细胞干预及细胞形态学观察 PB3A组予100 μg/mL PB3A干预24 h，对照组不干预;干预24 h倒置显微镜下观察两组细胞形态变化。

1.4 细胞……