脑缺血再灌注后大鼠运动皮质SIRT3的表达特点＊

西安市中心医院神经内科（西安710003）

常明则 吴海琴△ 乔 琳△△ 王新来 狄政莉 刘志勤 毛 佳 田 晔▲

沉默信信调节因子（Silent mating type information regulation 2，Sir2）家族属于第三类组蛋白去乙酰化酶，通过烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）参与调节组蛋白乙酰化，在基因沉默、染色质稳定、双链DNA断裂损伤后生理修复以及延长细胞周期中均起着重要的作用［1］。在哺乳动物共有7个SIRT的同源基因，分别命名为SIRT1-SIRT7。沉默信息调节因子3（Silent information regulator 3，SIRT3）是第一个被定位在哺乳动物细胞线粒体的NAD依赖的去乙酷化酶家族成员，广泛存在于线粒体基质和细胞核中，目前研究主要集中在调节代谢、防治变性疾病及抗衰老等方面，在线粒体能量生成、代谢、细胞凋亡和细胞内信号转导等方面发挥重要作用［2～4］。目前，SIRT3在缺血性脑损伤中的作用研究较少，本研究采用免疫组化技术观察大鼠全脑缺血再灌注后大脑运动皮质内SIRT3的动态变化情况。

材料与方法

1 实验材料

1．1 试剂与仪器：兔抗大鼠SIRT3单克隆抗体（SantaCruz公司），SABC试剂盒和DAB显色试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供，JGD-RF2射频双极电凝器，江湾I型脑立体定位仪。

1．2 动物分组：SD大鼠42只，雌雄不拘，体重200～250g，由西安交通大学医学院动物实验中心提供，实验前将动物置于实验室适应环境1周，自由进食、饮水，室温22±2℃，相对湿度65%，每天光照12 h。随机均分为6组，即：正常对照组，脑缺血再灌注6h、24h、72h、5d和7d组，每组7只。

2 实验方法

2．1 动物模型的建立：采用改良Pulsinelli四动脉阻断法［5］，以20%水合氯醛0．6ml／kg腹腔内注射麻醉，5min内痛觉及翻正反射消失，但有角膜反射。……