彭中友, 孙俊铭, 李 燕, 刘庆友, 于建宁, 施振旦
(1.江苏省农业科学院畜牧研究所/动物品种改良与繁育重点实验室,江苏 南京 210014;2.贵州省畜牧兽医学校,贵州 贵阳550018;3.广西大学动物科学学院,广西 南宁 530004)
人工辅助生殖技术主要依赖卵子体外成熟(IVM)技术发展而来,IVM技术能避免超数排卵中外源激素刺激造成的副作用,如卵巢过度刺激综合征[1-4],但与体内成熟卵子比较,IVM卵子发育潜力明显不如体内成熟卵子,IVM卵子受精率和胚胎存活率都低于体内卵子[5]。由此国内外对动物卵母细胞IVM条件、体外受精条件和胚胎体外培养条件进行了大量的研究优化,并在牛和小鼠卵子IVM和胚胎早期发育方面取得较好进展[2,6-8],但在猪的胚胎体外生产方面仍然面临2个主要问题,一是体外多精受精率高,二是体外受精卵子发育至囊胚比例低和体外胚胎发育质量低于体内发育胚胎质量[9-11]。
卵泡在发育过程中,卵子及其周围的颗粒细胞存在相互双向调控。卵母细胞通过旁分泌方式分泌系列生长因子如BMP、GDF9和活化素等作用于颗粒细胞促进其增殖[12]、分化[13]、代谢、凋亡[14]及卵丘扩展等[15],其中GDF9在卵泡发生过程和早期胚胎中表达[16],对卵巢和卵泡发育有重要调控作用[17-20]。卵泡液中GDF9含量与卵子核成熟和胚胎质量具有显著正相关性[21]。在卵母细胞IVM培养过程中添加GDF9能显著提高卵子成熟和早期胚胎的发育能力,这一作用在牛[6,8]与小鼠[2,7-8]上均得到证实,Gomez等[22]将猪卵母细胞-卵丘细胞复合体(Cumulus-oocyte complexes,COCs)与 能 分 泌GDF9的裸卵(DOs)共同培养发现DOs提高了孤雌激活后COCs中卵母细胞发育至囊胚的比例,但直接向猪卵母细胞IVM培养过程中添加GDF9是否能提高猪卵子成熟和早期胚胎的发育能力尚未见报道。……