提高大肠杆菌通过MVA途径合成异戊二烯

2015-01-02 05:04:29冯凡许杨陶勇刘伟丰林白雪
生物工程学报 2015年7期
关键词:途径

冯凡,许杨,陶勇,刘伟丰,林白雪



提高大肠杆菌通过MVA途径合成异戊二烯

冯凡1,2,许杨1,2,陶勇3,刘伟丰3,林白雪3

1 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西 南昌 330047 2 南昌大学中德联合研究院,江西 南昌 330047 3 中国科学院微生物研究所,北京 100101

冯凡, 许杨, 陶勇, 等. 提高大肠杆菌通过MVA途径合成异戊二烯. 生物工程学报, 2015, 31(7): 1073–1081.Feng F, Xu Y, Tao Y, et al. Improving isoprene production by engineered heterologous mevalonate pathway in Escherichia coli. Chin J Biotech, 2015, 31(7): 1073–1081.

异戊二烯是橡胶合成的重要前体物质。为了提高菌株的异戊二烯产量,本实验室在研究中构建了一株异戊二烯产气的菌株BW-01,基于蛋白质预算理论的指导,理性设计通过改变质粒拷贝数、增加稀有密码子等合成生物学手段调控关键限速酶编码基因表达,从而提高大肠杆菌外源MVA代谢途径的异戊二烯产量。摇瓶发酵实验中我们构建的新产气菌株BW-07比原有的产气菌株BW-01的产量提高了73%,达到了 761.1 mg/L。为后续菌株改造及进行发酵罐实验奠定了基础。

蛋白质预算,MVA途径,异戊二烯,大肠杆菌

异戊二烯(2-甲基-l,3-丁二烯) 是合成橡胶的重要前体物质[1-3],每年异戊二烯产量的95%被用于合成橡胶。此外,异戊二烯还是萜类化合物的结构骨架[4-7]。目前,异戊二烯主要是通过高温裂解石油气、化学合成和异戊烯脱氢法等化工手段获得,这样的生产方式能耗高、污染大、工艺复杂且生产效率低,而且随着石油等不可再生资源的枯竭,传统的异戊二烯生产方式将逐渐被淘汰。随着生物技术的不断发展,以工程菌为对象,解决能源问题的可行性越来越大[8-10]。

自然界中,某些植物……

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