绵羊Zfy基因干扰载体构建及性控效果观察

赞哈尔·波拉提，孙丽荣，张永生，贾斌，申红，王绪海，胡政香

（1石河子大学动物科技学院，石河子 832003；2内蒙古通辽市农畜产品质量安全中心，通辽 028000）

动物的性别控制(Sex control)技术是通过对动物的正常生殖过程进行人为干预，使成年雌性动物产出人们期望性别后代的一门生物技术，在畜牧生产中具有一定意义。目前均利用X、Y精子DNA含量的差异将其分离从而达到人为控制性别，如利用流式细胞仪分离X、Y精子，虽然其准确性较高，但其成本昂贵且生产周期长，使该技术在畜牧生产中不能大规模推广应用[1]。

随着生物技术的发展，RNA干扰（RNAi）技术因其具有特异、高效、易于操作等优点，迅速成为研究热点。RNAi是一种转录后的基因沉默现象，是通过人工合成或体内形成的双链小RNA，在细胞内特异性降解其同源mRNA，使相应的基因沉默，达到阻止细胞特定基因表达的目的，从而为细胞内基因表达的研究提供了新思路。

Zfy基因位于Y染色体短臂（Yp11.3）上，有 11个外显子和1个随机重复区域的13个“锌-指”结构组成，在雄性睾丸生长发育过程中发挥作用[2-3]。Zfy基因不仅能够特异性的与靶基因相结合，还具有特定的核定位信号区域和结合位点，从而定向引导靶基因穿过核膜，使其定位于精子细胞核内，所编码的蛋白作为转录调控因子，与Y精子的结构和功能发挥有关[4-5]。将与X、Y精子发育有关的Zfy基因结合RNAi技术控制X或Y精子的发育，可达到人为控制后代性别的方法为研究细胞内特定基因表达或沉默。

彭强等[6]首次用RNAi的方法通过构建Zfy基因siRNA重组表达载体进行小鼠体内RNAi的研究发现，子代出现雄性小鼠比例下降的现象；……