西红花苷对运动性疲劳小鼠MDA含量和SOD活性的影响

2015-01-06 09:01刘少华滨州医学院人文学院
大陆桥视野 2015年22期
关键词:力竭骨骼肌红花

刘少华/滨州医学院人文学院

西红花苷对运动性疲劳小鼠MDA含量和SOD活性的影响

刘少华/滨州医学院人文学院

目的 研究西红花苷对运动性疲劳小鼠的保护作用,阐明西红花苷抗运动性疲劳的作用。方法 复制小鼠力竭游泳模型,并测定应用西红花苷后小鼠达到力竭所需的时间以及MDA、SOD等指标。结果 西红花苷能明显提高小鼠游泳到达力竭的时间,提高小鼠骨骼肌和肝脏SOD活性,骨骼肌和肝脏MDA含量等指标。结论 应用西红花苷有利于延长游泳至力竭的时间,增强SOD活性,降低MDA含量,增强小鼠的抗氧化能力,维持细胞的正常生理功能。

西红花苷;运动性疲劳;力竭游泳

西红花苷是一类从栀子和西红花中提取的特殊的水溶性胡萝卜素。学者们研究发现,西红花苷有广泛的药理活性,如其可保护心脑血管、杀灭肿瘤细胞、保护神经细胞和保肝作用。运动性疲劳是一直是体育学界和医学界研究的热点。本实验利用小鼠力竭游泳模型,研究给小鼠补充西红花苷是否影响小鼠的运动能力,从抗氧化角度来探讨西红花苷抗运动性疲劳作用,为研发西红花苷成为运动补剂提供实验依据。

1.材料和方法

1.1主要试剂和仪器

西红花苷由滨州医学院药学院药物研究所提供,纯度≧98%。MDA测定试剂盒及SOD测定试剂盒购于南京建成生物工程有限公司。L - 550台式低速离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司),Sartorius BT 25s电子天平(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司),80-2台式低速离心机(山海医疗器械(集团)有限公司手术器械厂);WFZUV-2000 型紫外可见分光光度计(尤尼柯(上海)仪器有限公司);秒表;温度计;灌胃针头,手术器械。

1.2方法

1.2.1动物分组和给药。健康雄性昆明种小鼠,体质量 (22± 2) g,由滨州医学院实验SPF级动物中心提供。实验动物在整个实验过程中常规分笼饲养,每笼12只,自由饮水、进食。实验前称小鼠体重,随机分为六组,每组12只,分别为安静组、力竭游泳组、药物10、15、20mg/kg组。 药物组分别用10、15、20mg/kg的西红花苷灌胃,每日1次,安静组和力竭游泳组小鼠给以等量的生理盐水,实验周期为4周。

1.2.2实验方法。于末次给药30min后,力竭游泳组及药物药物10、15、20mg/kg组进行负重游泳:在距离小鼠尾根部1~ 2cm处,负重5%体质量的铅皮,置入水温30±2℃、水深25cm的游泳槽中游泳,记录小鼠自游泳开始至力竭的时间。力竭判断标准∶小鼠沉入水中超过10s,且在平地时翻正反射消失。

1.2.3标本收集和测定。在负重游泳后,断头处死小鼠,取部分肝、骨骼肌,置入组织匀浆器中研磨后取上层清液,按照试剂盒说明书测定SOD、MDA指标。

1.3统计学方法

实验数据采用SPSS 13.0软件,进行统计学处理。所有数据均以x±s表示,组间比较用方差分析。P≤ 0.05为差异有显著性统计学意义。

2.结果

2.1小鼠力竭游泳时间 灌胃给药4周后,进行力竭游泳实验,不同剂量西红花苷对小鼠力竭游泳时间的影响见表1。药物10、15、20mg/kg组与力竭游泳组相比,小鼠力竭游泳时间均延长。其中15mg/kg药物组力竭游泳时间明显延长,与安静组相比,具有统计学意义(P< 0.05)。

表1 西红花苷对小鼠力竭游泳时间的影响

2.2西红花苷对小鼠肝、骨骼肌MDA水平的影响 进行力竭游泳实验结束后,立即处死小鼠,取肝脏和骨骼肌,加一定比例的稀释液研磨后,测定上层细胞清液中MDA水平,结果见表2。与安静组相比,力竭游泳组小鼠肝脏和骨骼肌MDA水平均升高,其差异具有统计学意义(p<0.05),而西红花苷则降低力竭运动所致MDA升高,其差异具有统计学意义(p<0.05)。

表2 西红花苷对小鼠肝、骨骼肌MDA水平的影响

2.3西红花苷对小鼠肝、骨骼肌SOD活性的影响 取肝脏和骨骼肌组织研磨后的上清后测定上清液中SOD活性,结果见表3。与安静组相比,力竭游泳组小鼠肝脏和骨骼肌SOD活性降低,其差异具有统计学意义(p<0.05),与力竭游泳组相比,西红花苷药物组小鼠肝脏和骨骼肌SOD活性升高,差异具有统计学意义。

表3 西红花苷对小鼠肝、骨骼肌SOD活性的影响

讨论

学者们研究发现,运动疲劳的发生与体内自由基异常增多直接相关[1]。力竭运动时,由于局部耗氧量增多、能量消耗增加、肌骨骼肌细胞线粒体负荷加重等因素导致机体内的酶系统和非酶系统产生大量自由基。异常增多的自由基触发脂质过氧化反应,形成的脂质过氧化物经代谢后产生 MDA,MDA与骨骼肌、心脏、肝脏等组织器官内的蛋白质、核酸等发生交联形成希夫式碱,进而使细胞的流动性和渗透性发生改变,细胞膜的正常结构破坏,细胞功能丧失,细胞内环境异常而影响细胞功能,产生疲劳[2]。因此,MDA反映机体自由基产生的水平和体内脂质过氧 化的情况,同时也是体内脂质损伤的重要指标。本实验研究发现,与力竭游泳组相比,西红花苷组肝脏和骨骼肌MDA活性降低(p<0.05),SOD活性升高(p<0.05),说明西红花苷具有清除自由基的作用,对自由基过多造成的肝脏、肾脏的损害具有保护作用。

总之,西红花苷具有抗运动性疲劳作用,其作用机制与降低血、肝和骨骼肌细胞中MDA含量,增强血、肝和骨骼肌细胞中SOD活性有关。

[1] Ortenblad N,Sjogaard G,Madsen K.Impaired sarcoplasmic reticulum Ca2+release rate after fatiguing stimulation in rat skeletal muscle[J].Appl Physiol,2000,89(1)∶2210-217.

[2] 苑伟,李士博,马迎春,等.红景天纳米粉对小鼠抗缺氧和抗疲劳作用的实验研究[J].西 北 药 学 杂 志,2011,26(3):122-123.

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