Cox－2在槲皮素抑制耐药白血病HL－60、HL－60A 细胞增殖中的作用

牛国敏，张复华，杨国雷，凌奕文，潘焕玉，徐嘉愉

（南方医科大学附属南海医院，广东 佛山 528200）

急性白血病是血液系统常见的恶性疾病，自然病程短，死亡率高，近年来随着化疗方案的不断改进，缓解率有很大提高，但仍有部分患者不能缓解或缓解后很快复发。白血病细胞对化疗药物产生耐药是化疗失败的主要原因。环氧化酶－2（Cyclooxygense－2，Cox－2）是前列腺素合成过程中的重要限速酶［1］，在多种肿瘤包括急性白血病中表达异常增高［2－3］，通过多种途径参与白血病的发生发展。有研究表明Cox－2与恶性肿瘤耐药有关。槲皮素（Quercetin，Que）是自然界常见的植物黄酮类化合物，通过抑制Cox－2的表达诱导急性白血病细胞凋亡［4］。那么槲皮素是否可以同样抑制急性白血病耐药细胞凋亡，其作用机制是否与Cox－2有关，本研究通过观察槲皮素处理后Cox－2的表达水平来探讨Cox－2在急性白血病细胞耐药中的作用。

1 材料和方法

1.1 槲皮素 槲皮素（sigma公司）用二甲亚砜（DMSO）溶解，浓度为100mmol／L，－20 ℃低温保存。

1.2 细胞培养 耐药白血病细胞株HL－60、HL－60A 细胞购自中国科学院上海细胞生物研究所，本实验室冷冻保存。复苏的HL－60细胞接种于含10%胎牛血清（杭州四季青 中国）、3%谷氨酰胺的RPMI 1640完全培养基，置于37 ℃、5%CO2细胞培养箱中培养，每2～3d传代换液1次，取对数生长期的细胞进行实验。

1.3 外周血单个核细胞（Peripheral blood mononu－clear cells，PBMC）的提取 无菌操作抽取正常成人新鲜离体的静脉全血，EDTA 抗凝后将细胞悬液加在淋巴细胞分离液上，离心后吸出血浆层和淋巴细胞分离液交界面的外周血单个核细胞。

1.4 CCK－8 法……