响应面法优化毛鸡骨草叶中黄酮成分提取工艺

张 平， 李春阳， 袁旭江

(广东药学院中药开发研究所，广东 广州510006)

毛鸡骨草为豆科植物毛相思子Abrus mollis Hance 的干燥全草，又名大叶鸡骨草，是广西特产药材，常作鸡骨草替用品，其味甘、淡，性凉，具有清热解毒、利湿、舒肝止痛的功效，主要用于治疗急慢性肝炎、肝硬化腹水、胃痛等病症［1］。研究表明，芹菜素黄酮碳苷类化合物为毛鸡骨草保肝的主要药效活性成分之一，另外还含有降酶、降酯等药效活性［2-5］，其中含有量最高的黄酮成分主要为芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-葡萄糖苷、芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷、芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-阿拉伯糖苷［6］。由于毛鸡骨草根、茎、叶所含黄酮成分的差异较大，尤以叶片中含有量最高［7］，而且相关的研究文献较少，因此本研究在HPLC 基础上运用Box-Behnken 响应面试验设计方法［8-10］优选毛鸡骨草叶中黄酮成分的提取工艺。在优化过程中，对试验因素各水平进行分析，克服了以往正交试验［11-12］只能对孤立点进行分析，而不能给出直观图形的缺陷［13］，并以芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-葡萄糖苷、芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷和芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-阿拉伯糖苷这三个主要黄酮成分含有量的总和为指标响应值，选取乙醇体积分数、液料比、提取时间、提取次数为主要影响因素，用于考察并筛选出最佳提取工艺，可为毛鸡骨草叶的新药研究和资源开发利用提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器与设备 Agilent 1100 HPLC 色谱仪，包括DAD检测器(美国安捷伦公司);KQ 3200 超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);JJ1000 电子天平(常熟市双杰测试仪器厂);BP 211D 电子天平(德国Sartorius 公司);RE-52 AA 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。……